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文献和实验了结构并进行了合成,已知是由嘧啶部分和噻唑部分通过 CH2 基连接而成。现在医学上用的维生素 B1 是工业合成的。以变化成发荧光的硫色素或是和对氨基苯丙酮反应使之发色进行定量。还有用生物学方法进行定量测定的,也有通过对患缺乏症的鸽、鼠的生长恢复,或多发性神经炎的治愈来进行测定的,或对缺乏硫胺素培养基上的藻菌类( phyeomyces blakeslecanus)和酿酒酵母等增殖来进行测定。硫胺素能由绿色植物和微生物合成。在高等植物中,存在于幼嫩组织中并使生理作用旺盛,另也存在于种子中,特别是种胚
酸及其它产物,3,5-二硝基水杨酸则被还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸。在一定范围内,还原糖的量与棕红色物质颜色的深浅成正比关系,利用分光光度计,在540nm波长下测定光密度值,查对标准曲线并计算,便可求出样品中还原糖和总糖的含量。由于多糖水解为单糖时,每断裂一个糖苷键需加入一分子水,所以在计算多糖含量时应乘以0.9。三、实验材料、主要仪器和试剂1. 实验材料小麦面粉;精密pH 试纸。2. 主要仪器(1)具塞玻璃刻度试管:20mL×11(2)大离心管:50mL×2(3)烧杯:100mL×1(4)三角
改良过碘酸钠标记法制备酶标抗体 HRP分子中与酶活性无关的糖基被过碘酸钠氧化为醛基,再与抗体蛋白的氨基形成Schiff碱。为了防止酶蛋白的氨基与醛基发生自身偶联,在标记前先用2,4-二硝基氟苯(DNFB)封闭酶蛋白中残留的a-和e-氨基。酶与抗体的结合反应后,再加入硼氢化钠还原成稳定的结合物。 (1) 取HRP 5mg溶于0.2mol/L,pH5.6醋酸盐缓冲液1ml中,加入1%DNFB无水乙醇溶液0.1ml,室温下轻微搅拌1h
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