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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 免疫原:
见说明书
- 亚型:
见说明书
- 形态:
粉末/液体
- 保存条件:
-20oC 至 -80oC
- 克隆性:
Polyclonal
- 标记物:
未标记
- 适应物种:
Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
- 宿主:
Rabbit,兔
- 应用范围:
WB, ICC, IHC-P, IHC-F, ELISA
- 浓度:
200ug/ml
- 靶点:
见说明书
- 抗体英文名:
Polyclonal Antibody to Platelet Factor 4 (PF4)
- 抗体名:
血小板因子4(PF4)多克隆抗体
- 规格:
100ug/200ug
www.klbscience.com
1. 免疫原的制备
普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物
选择动物时应考虑抗原和免疫动物的种属差异,种系相近会影响免疫效果,一般要求动物适龄,健康,体重符合要求。常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量生产时需要用到狗、绵羊、山羊等。动物接受免疫的乳液量小鼠为1.0~2.0 ml, 家兔为2~4 ml。添加佐剂可帮助抗原在注射部位缓慢释放,增加免疫效果,常用佐剂为弗氏不完全佐剂。
初次免疫后要经过2~3次以上的加强免疫以形成较高水平的IgG抗体。初次免疫和再次免疫之间,小动物一般间隔10~14天,大动物间隔60天左右。在每次加强免疫后,进行抗血清效价测定,当效价达到理想状态时,便采集抗血清。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。也可采用尾巴或眼眶取血,静置待血液凝固成血块收缩析出血清,3000rpm离心15 min,取上清。这个过程要注意动物的养护,耗时长,但得率低,得到的血清还需进一步的纯化。
4. 免疫血清的纯化与鉴定
得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存
建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
由于多克隆抗体具有成本低、制备周期短且制备步骤相对简单、可识别多个表位等优点,在科研领域应用非常广泛。以上就是关于多克隆抗体制备的一个基本流程。供大家参考。
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文献和实验β-血小板球蛋白(β-TG)和血小板第四因子(PF4)是血小板α颗粒中特有的蛋白。当体内有过多的血小板被激活,释放反应亢进时,二者血浆中的浓度升高,医学教育网搜|索整理因此,β-TG和PF4是血小板活化的重要指标。二者的检测多采用ELISA法。用抗β-TG或抗PF4的抗体包被微孔板,加入待测血浆,血浆中的或与包被的抗体结合,再加入酶标的抗β-TG抗体或抗PF4抗体,与在板上的β-TG或PF4结合,最后加入底物显色。显色的深浅与受检血浆中β-TG或PF4的含量成正比,从标准曲线中计算出受检血浆
第4因子(PF4)测定意义增高表明血小板被激活及释放反应亢进,见于: 高凝状态和血栓性疾病,如心肌梗死、脑血管和周围血管病变、DIC、糖尿病、高脂血症、妊娠高血压等; 其他,如恶性肿瘤、尿毒症、系统性红斑狼疮等。 六、血栓烷素B2(TXB2)测定意义 TXB2增高见于:动脉粥样硬化、心肌梗死、血栓性疾病、糖尿病、高脂血症、恶性肿瘤等。 TXB2减低见于:先天性血小板花生四烯酸代谢障碍性疾病或服用阿司
血小板在参与血栓形成和动脉粥样硬化中起重要作用。TXA2、5HT引起血管收缩:PDGF、β-TG、PF4刺激平滑肌细胞引起动脉硬化,GPIIb/IIla纤维蛋白原受体活化引起血小板聚集,与凝血系统活化形成的纤维蛋白构成血小板栓子。 血小板粘附、聚集、释放产物、花生烯酸代谢、促凝作用及受体表达参与上述过程。在体内,狭窄血管产生的高切应力,各种细胞释放的产物以及内皮损伤等因素均可构成激活血小板的刺激因素。除上述环境因素外,血小板自身的某些特性改变,譬如:基因多态性,在发生血栓形成中
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