- ￥1280 - 3980
- KALANG/进口品牌
- 中国/美国
- KL161Mu021
- 2026年02月09日
企业认证
相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
6-12months
- 英文名：
Recombinant Elastin Microfibril Interface Located Protein 2 (EMILIN2)
- 库存：
大量
- 供应商：
康朗生物
- 规格：
50ug/100ug/1mg
www.shklbio.com
应用重组DNA将目标基因进行表达得到的蛋白质成为重组蛋白，重组蛋白在生物信号传导过程，药物研发，科学研究中扮演着重要角色。下面来介绍一下重组蛋白的生产工艺流程。
1.基因扩增
（1）引物合成
搜索目标蛋白基因信息，结合蛋白的结构信息，选取片段或全长设计引物。注意避开跨膜区，以及复杂的二级结构，优选N端或C端，引物评分尽可能高，并搜索出核酸序列的酶切位点，使用载体等信息。经研发部根据研发经验提出修改意见最终定稿后交由第三方公司进行引物合成。
（2）基因克隆机重组鉴定
1）PCR
根据目的蛋白特异性表达组织，选取特异组织RNA用上述引物进行PCR扩增。进行琼脂糖凝胶电泳后，根据分子量大小选取目标片段进行切胶回收。再次PCR扩增，获得大量DNA，并进行PCR产物回收。
2）酶切，连接
根据酶切位点，将目标PCR产物以及相应载体进行酶切，获得粘性末端的DNA产物后，进行琼脂糖凝胶电泳，根据目标条带大小选取相应片段切胶回收。并将具有相同酶切位点的载体与DNA片段进行连接
3）转化，挑菌验证
将连接好的目的片段转化感受态E.coli,并在LB平板上进行过夜培养。挑取平板上的菌斑进行验证PCR，将PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳，根据目标条带大小选取相应菌液进行测序，测序正确后留种保存。
2.蛋白表达
（1）蛋白表达小试
挑取少量菌种进行培养，并诱导表达，将表达的蛋白进行SDS-PAGE，根据目标条带大小判断目标蛋白是否表达，小试表达成功后将进行蛋白预放大实验
（2）蛋白放大实验
将小试表达成功的蛋白菌株用400-800 ml培养基进行培养表达，进行SDS-PAGE，根据目标条带大小判断目标蛋白是否表达成功，预放大实验成功后将进行进一步的蛋白放大实验，放大实验使用800-1600 ml培养基进行培养，具体验证同上。
3.蛋白纯化
由于载体中包含了his标签，故采用镍柱进行纯化。有些蛋白可能会形成包涵体，在之前的一篇专题中我们有详细介绍过大肠杆菌重组蛋白纯化方法,纯化后的蛋白会进行SDS-PAGE， BCA等实验分子量以及纯度进行验证，纯度超过95%。
4. 质量检测
获得蛋白后会进行冻干，冻干之后会进行常规蛋白实验进行验证，合格后保存。
重组蛋白的制备主要是依据以上原理及步骤。以上是以原核表达举例。在制备过程中每一个环节都至关重要，不同的蛋白会在不同的环节出现技术难点，包括目的基因的扩增，包涵体的形成都会对重组蛋白的研发造成困境。但Cloud Clone Corp. 具有多年研发经验，还可提供真核表达系统，哺乳动物细胞表达系统，用户可根据需要选择，同时对蛋白有特殊要求我们也可提供私人定制。
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验中科院高福院士课题组 2020 年发表了哪些重要的研究成果？
生长。相反，PD-1 或 PD-L1 的过表达抑制肿瘤细胞增殖和集落形成。此外，靶向 PD-1 或 PD-L1 的封闭抗体会促进细胞培养和异种移植物中肿瘤的生长。从机制上讲，PD-1 和 PD-L1 的协调激活了其主要的下游信号传导途径，包括 AKT 和 ERK1 / 2 途径，从而增强了肿瘤细胞的生长。这项研究表明，PD-1 / PD-L1 是潜在的肿瘤抑制因子，并且潜在地调节了对抗 PD-1 / PD-L1 治疗的反应，因此代表了最佳癌症免疫治疗方法的潜在生物标志物。 图源：PNAS 4、揭示沙粒
不只是 PD-1：CD96 正成为免疫治疗的下一个“必争之地”
[5]。这些结果提示，CD96 在肿瘤中的 NK 细胞调控中可能发挥关键作用。 2.3 CD96 在不同生理和病理环境中的表达差异 CD96 的表达不仅存在于肿瘤相关免疫细胞中，在特殊生理环境中也具有明显特征。例如，在早期妊娠母胎界面，CD96 高表达于蜕膜自然杀伤细胞，而 TIGIT 主要表达于 T 细胞，CD155 和 CD112 主要分布于间期基质细胞和滋养层细胞 [6]。CD96+ dNK 细胞通常表现为低细胞毒性、高黏附性表型，并参与母胎界面的免疫抑制效应 [6]。这说明，CD96 的表达特征与其功能
1. 激酶结构域的关键结构特征[2]。 该结构域由 N 端叶 (橙色) 和 C 端叶 (绿色) 组成，两者通过铰链序列连接。ATP 结合位点 (红色) 位于两个叶的界面处。 根据该结构域的序列相似性，可进一步划分为八个主要家族：TK、TKL、STE、CK1、AGC、CAMK、CMGC 和 RGC。这些家族构成了细胞信号转导的核心框架。非典型蛋白激酶虽具有激酶活性，但其催化结构域与典型激酶不同，体现了激酶在进化过程中的功能多样性，其中包含 PI3K、mTOR 等多个关键药物
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
