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- 技术资料
- 免疫原:
见说明书
- 亚型:
见说明书
- 形态:
粉末/液体
- 保存条件:
-20℃至 -80℃
- 克隆性:
Polyclonal
- 标记物:
未标记
- 适应物种:
General
- 宿主:
Rabbit,兔
- 应用范围:
WB, ICC, IHC-P, IHC-F, ELISA
- 浓度:
200ug/ml
- 靶点:
见说明书
- 抗体英文名:
Polyclonal Antibody to 17-Hydroxyprogesterone (17-OHP)
- 抗体名:
17-羟孕酮(17-OHP)多克隆抗体
- 规格:
100ug/200ug
www.klbscience.com
1. 免疫原的制备
普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物
选择动物时应考虑抗原和免疫动物的种属差异,种系相近会影响免疫效果,一般要求动物适龄,健康,体重符合要求。常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量生产时需要用到狗、绵羊、山羊等。动物接受免疫的乳液量小鼠为1.0~2.0 ml, 家兔为2~4 ml。添加佐剂可帮助抗原在注射部位缓慢释放,增加免疫效果,常用佐剂为弗氏不完全佐剂。
初次免疫后要经过2~3次以上的加强免疫以形成较高水平的IgG抗体。初次免疫和再次免疫之间,小动物一般间隔10~14天,大动物间隔60天左右。在每次加强免疫后,进行抗血清效价测定,当效价达到理想状态时,便采集抗血清。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。也可采用尾巴或眼眶取血,静置待血液凝固成血块收缩析出血清,3000rpm离心15 min,取上清。这个过程要注意动物的养护,耗时长,但得率低,得到的血清还需进一步的纯化。
4. 免疫血清的纯化与鉴定
得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存
建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
由于多克隆抗体具有成本低、制备周期短且制备步骤相对简单、可识别多个表位等优点,在科研领域应用非常广泛。以上就是关于多克隆抗体制备的一个基本流程。供大家参考。
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文献和实验17-酮甾类(酮类固醇) 17-ketosteroid,17 oxosteroid
甾类骨架上第 17位碳原子上的氧基的化合物之总称,缩写 17KS。在生物体内,是由 17位羟基的酶促氧化和 C17 -C20 键切断生成的。在尿中含有来自副肾皮质的去氢表雄酮及其硫酸酯,睾丸酮的代谢物雄酮和表雄酮等。雌酮也以 17-酮甾类的形态存在着。因为副肾皮质和卵巢肿瘤患者的尿中的排出量很高,所以可作为临床的诊断指标。又因 17-酮甾类在碱性间 -硝基苯溶液中呈紫色,所以可进行定量测定。
C18 H24 O2 雌甾 -1, 3, 5( 10) -三烯 -3, 17-二醇。系代表性的性激素,可用卵巢、胎盘等制备,在卵泡液、胎盘、妊娠马尿中均可检出。进入子宫上皮细胞后,与性激素受体形成复合体进入细胞核,从而促进新的蛋白质合成,具有引起细胞增殖的作用。此外,能影响未成熟或切除卵巢的大鼠或小鼠的阴道分泌物,使呈现由角化细胞组成的显微镜象,所以也用作生物试验。在生物体内,在 17β -羟甾类脱氢酶的作用下氧化成为雌酮。 17α -羟甾体性激素的作用弱。作为女性
甾类(化合物)17α-羟化酶 steroid 17α-hy- droxylase,s eroid 17α-monooxygeoase
甾类(化合物)17α-羟化酶 steroid 17α-hy- droxylase,s eroid 17α-monooxygeoase 存在于睾丸、肾上腺的微粒体部分。是一种在甾类分子的17α位置上引入羟基的酶。EC1、14、99、9。需要有分子态氧和NADPH存在,与P-450有关。例如将黄体酮和孕(甾)烯醇酮各自成为17α-羟基黄体酮和17α-羟基孕烯醇酮。在鼠的肾上腺中不存在此酶。
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