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- KALANG/进口品牌
- 中国/美国
- kl489Ra01
- 2025年07月06日
- WB, ICC, IHC-P, IHC-F, ELISA
- Rabbit，兔
- Rattus norvegicus (Rat)
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 免疫原：
见说明书
- 亚型：
见说明书
- 形态：
粉末/液体
- 保存条件：
-20oC 至 -80oC
- 克隆性：
Polyclonal
- 标记物：
未标记
- 适应物种：
Rattus norvegicus (Rat)
- 宿主：
Rabbit，兔
- 应用范围：
WB, ICC, IHC-P, IHC-F, ELISA
- 浓度：
200ug/ml
- 靶点：
见说明书
- 抗体英文名：
Polyclonal Antibody to Ferroportin (FPN)
- 抗体名：
膜铁转运蛋白(FPN)多克隆抗体
- 规格：
100ug/200ug
www.klbscience.com
1. 免疫原的制备
普通的大分子蛋白，通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白，纯化鉴定后可直接作为免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原，常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物
选择动物时应考虑抗原和免疫动物的种属差异，种系相近会影响免疫效果，一般要求动物适龄，健康，体重符合要求。常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等，大量生产时需要用到狗、绵羊、山羊等。动物接受免疫的乳液量小鼠为1.0~2.0 ml， 家兔为2~4 ml。添加佐剂可帮助抗原在注射部位缓慢释放，增加免疫效果，常用佐剂为弗氏不完全佐剂。
初次免疫后要经过2~3次以上的加强免疫以形成较高水平的IgG抗体。初次免疫和再次免疫之间，小动物一般间隔10~14天，大动物间隔60天左右。在每次加强免疫后，进行抗血清效价测定，当效价达到理想状态时，便采集抗血清。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血，家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血，家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。也可采用尾巴或眼眶取血，静置待血液凝固成血块收缩析出血清，3000rpm离心15 min，取上清。这个过程要注意动物的养护，耗时长，但得率低，得到的血清还需进一步的纯化。
4. 免疫血清的纯化与鉴定
得到的抗血清需要进一步的纯化，利用偶联了抗原的亲和柱进行层析，具有高效，特异性强，纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存
建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价，而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
由于多克隆抗体具有成本低、制备周期短且制备步骤相对简单、可识别多个表位等优点，在科研领域应用非常广泛。以上就是关于多克隆抗体制备的一个基本流程。供大家参考。
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文献和实验浆，这种现象是由于切片的原因所致。但是，抗原的表达，在原来的表达上就有核、浆、膜之分。有的抗原可在一个部位表达，有的抗原 则可在两个 部位表达 ，例如PCNA，它可以在细胞核 表达，也可在细胞浆表达 。有的抗原，可表现为双向表达，如上皮(样)肿瘤间皮肿瘤和滑膜内瘤等，用角蛋白标记时，可有阳性表达，用波形蛋白标记时，也可有阳性表达。 对于上述的许多现象，在观察检测时，就要特别地小心，不断地积累经验，以便于更好地鉴别各种抗原的所在部位。某些抗原不是在任何时候能表达出来的它们 需要一定的时间
） 双阳性细胞即为幼稚红细胞，但无法区分原始及中晚幼红. 19、请问流式检测膜蛋白表达的变化用多克隆抗体出结果的机会大吗？ 流式的抗体和WB的抗体是不同的（有部分可以通用），多抗一般是大的变性蛋白为抗原制备的，而WB的中被检测蛋白就是变性状态，所以很吻合，而流失中一般蛋白还是保持了天然构象，所以产生的多抗可能不太好，而需要用很小特定的决定簇为抗原制备单克隆抗体。20、在下最近作人外周血流式，作表面及其胞内染色，试剂说明书说要先分离外周血单个核细胞再染色，我有时候分的红细胞比较多，其他的方法试过
，放置48小时。洗了后应该尽快检测。如果做好不能及时检测，我们一般是加入等量的2%的多聚甲醛固定，4度冰箱避光贮存。一般过夜没有问题，第二天同样PBS 2ml 洗涤细胞一次，上机检测。18、如何分选原始红细胞？CD71（转铁蛋白受体）--幼稚细胞的标记CD235（GPA）--红细胞的标记（小鼠有Ter119）双阳性细胞即为幼稚红细胞，但无法区分原始及中晚幼红.19、请问流式检测膜蛋白表达的变化用多克隆抗体出结果的机会大吗？流式的抗体和WB的抗体是不同的（有部分可以通用），多抗一般是大的变性蛋白为抗原
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