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纤连蛋白(FN)多克隆抗体

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  • ¥1 - 1980
  • KALANG/进口品牌
  • 中国/美国
  • 2025年07月15日
  • WB, ICC, IHC-P, IHC-F, ELISA
  • Rabbit,兔
  • Homo sapiens (Human)
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    • 详细信息
    • 文献和实验
    • 技术资料
    • 免疫原

      见说明书

    • 亚型

      见说明书

    • 形态

      粉末/液体

    • 保存条件

      -20℃至 -80℃

    • 克隆性

      Polyclonal

    • 标记物

      未标记

    • 适应物种

      Homo sapiens (Human)

    • 宿主

      Rabbit,兔

    • 应用范围

      WB, ICC, IHC-P, IHC-F, ELISA

    • 浓度

      200ug/ml

    • 靶点

      见说明书

    • 抗体英文名

      Polyclonal Antibody to Fibronectin (FN)

    • 抗体名

      纤连蛋白(FN)多克隆抗体

    • 规格

      100ug/200ug

    多克隆抗体的制备
    www.klbscience.com
    多克隆抗体(polyclonal antibody, pAb)是指用含有多个抗原决定簇的抗原免疫动物后刺激机体多个B细胞克隆产生针对多种抗原表位的不同抗体,得到的免疫血清含有多种抗体。多克隆抗体可应用于WB、IHC、Elisa、IP等实验中,是生物医学研究领域不可或缺的研究伙伴。下面我们会来介绍一下多克隆抗体的制备过程。
    1. 免疫原的制备
    普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原。
    小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
    2. 免疫动物
    选择动物时应考虑抗原和免疫动物的种属差异,种系相近会影响免疫效果,一般要求动物适龄,健康,体重符合要求。常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量生产时需要用到狗、绵羊、山羊等。动物接受免疫的乳液量小鼠为1.0~2.0 ml, 家兔为2~4 ml。添加佐剂可帮助抗原在注射部位缓慢释放,增加免疫效果,常用佐剂为弗氏不完全佐剂。
    初次免疫后要经过2~3次以上的加强免疫以形成较高水平的IgG抗体。初次免疫和再次免疫之间,小动物一般间隔10~14天,大动物间隔60天左右。在每次加强免疫后,进行抗血清效价测定,当效价达到理想状态时,便采集抗血清。
    3. 免疫血清的收集
    一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。也可采用尾巴或眼眶取血,静置待血液凝固成血块收缩析出血清,3000rpm离心15 min,取上清。这个过程要注意动物的养护,耗时长,但得率低,得到的血清还需进一步的纯化。
    4. 免疫血清的纯化与鉴定
    得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
    5. 免疫血清的保存
    建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
    由于多克隆抗体具有成本低、制备周期短且制备步骤相对简单、可识别多个表位等优点,在科研领域应用非常广泛。以上就是关于多克隆抗体制备的一个基本流程。供大家参考。

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