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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 形态:
粉末/液体
- 保存条件:
-20℃至-80℃
- 克隆性:
见说明书
- 标记物:
未标记
- 适应物种:
Homo sapiens (Hukl)
- 宿主:
Mouse小鼠,Human人,Rat大鼠、、、、、
- 应用范围:
WB, ICC, IHC-P, IHC-F, ELISA
- 浓度:
500ug/ml
- 抗体英文名:
Monoclonal Antibody to Complement Component 1, Q Subcomponent C (C1qC)
- 抗体名:
补体成分1q子成分C(C1qC)单克隆抗体
- 规格:
200ug
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单克隆抗体制备的基本过程如下:
(1)用抗原免疫小鼠;
(2)从抗原免疫过的小鼠获取脾细胞;
(3)应用细胞杂交技术使骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合,得到杂交瘤细胞。这种细胞不仅能够像B淋巴细胞一样合成性质稳定的转移性抗体,而且能够像骨髓瘤细胞一样无限复制,这样就可以产生大量且性质专一的鼠源抗体;
(4)对获得的杂交瘤细胞进行筛选,选出能分泌高效价抗体的杂交瘤;
(5)对已筛选出的单个细胞进行鉴定和克隆。
杂交瘤产生的单克隆抗体在各个领域中应用越来越广,有很大的优点和潜力。能够根据需要进行研发生产,可建立稳定的细胞株持续供给应用,相比于抗血清能够减少大量的动物和费用,而且纯度高,均一性好,可作为一种标准试剂。
在获得能分泌高效价抗体的杂交瘤细胞株后,一般有两种方法来获得单克隆抗体:小鼠腹腔注射杂交瘤细胞和细胞培养。
(1)小鼠腹水:
将杂交瘤细胞接种到小鼠的腹腔,杂交瘤在腹腔内增殖,取得腹水进行纯化即可得到抗体。此法易于操作,重复性高,且花费少,得到的抗体量多,但伤害动物,而且当需要大规模制备抗体时需要大量动物。
(2)细胞培养:
将杂交瘤细胞进行培养,培养后的上清液中即含有抗体。这种方法适合大规模生产抗体。但是这种方法获得的抗体杂质相对较多,因为细胞上清含有培养液,pH指示剂,细胞代谢废物等。而且培养用的血清中的成分不明确,可能会含有能影响抗体纯度的杂蛋白。所以在细胞培养中会逐渐将杂交瘤细胞通过逐步减少血清来驯化到无血清培养。
总之,单克隆抗体的高特异性,重复性使其在生物研究以及医药方向都有良好的应用基础以及前景。
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然而,要想得到一张高质量的免疫组化染色切片也并非易事。由于切片制作和免疫组化染色过程均存在很多步骤或环节,每一个步骤或环节都需要操作者严格控制实验条件,否则可能会影响到最终结果。
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文献和实验C1分子概述: C1是经典激活途径中的起始成分。它是由1个分子的C1q和2个分子的C1r及2个分子的Cls借Ca2连接而成的大分子复合物。分子量约为750kDa.其中C1q为具有识别作用的亚单位,C1r和C1s为具有催化作用的亚单位。 (一)C1qC1q为各种补体分子中分子量最大(410kDa)的γ球蛋白。其分子结构较特殊和复杂,由A.B.C三种不同类型的肽链所组成。其中A.B.C链各6条,共18条。A.B.C三种肽链的分子量不尽相同,分别为24、23和22kDa,各含有
单克隆抗体制备技术Burnef(1957)细胞系群选择学说(clonal selection theory)认为,每一个淋巴细胞只具备单一的受体特异性,受到刺激后,只能产生一种针对其可识别的抗原决定簇的抗体;抗体的多样性是由机体遗传存在着能与众多抗原决定簇起反应的淋巴细胞系而决定的;一个祖先抗体形成细胞分裂繁殖而成的细胞系(克隆clone或无性繁殖细胞系)产生的抗体具有完全相同的分子结构和性状;从一个克隆细胞系产生的抗体,称单克隆抗体(monoclonal antibody,McAb);一个
或BACB/C和瑞士小鼠杂交子一代。2、动物实验设施动物实验设施应有相关部门颁发的二级以上合格证。3、腹水制备取适量扩增培养的杂交瘤细胞注射小鼠腹腔制备腹水,小鼠可以预先用液体石蜡或降植烷等处理。(二)细胞培养法可以采用发酵罐培养,亦可用细胞培养瓶培养收集上清液制备单克隆抗体。培养基用无牛血清或低牛血清培养基,不能用-内酰胺类抗生素。(三)抗体纯化可采用盐析法、分子筛层析、离子交换亲和层析等适宜的方法。1、尽可能选用一些不引起免疫球蛋白聚合、变性等的纯化方法及条件。2、应验证所用的纯化方法能去除可能存在
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