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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 供应商:
钰博生物
- 细胞类型:
复苏
- ATCC Number:
详见官方网站
- 组织来源:
见说明书
- 物种来源:
人、大鼠、小鼠、、、、
- 免疫类型:
请咨询销售人员
- 细胞形态:
上皮样;多角形
- 是否是肿瘤细胞:
见说明书
- 器官来源:
见说明书
- 运输方式:
干冰运输or活细胞运输
- 年限:
见说明书
- 生长状态:
贴壁生长
- 规格:
1ml/株
饲养细胞(Feeder cells)的制备:
在细胞融合后选择性培养过程中,RF-48细胞,ATCC细胞由于大量骨髓瘤细胞和脾细胞相继死亡,此时单个或少数分散的杂交瘤细胞多半不易存活,通常必须加入其他活细胞使之繁殖,这种被加入的活细胞称为饲养细胞。饲养细胞促进其他细胞增殖的机制尚不明了,一般认为它们可能释放非种属特异性的生长刺激因子,为杂交瘤细胞提供必要的生长条件;也可能是为了满足新生杂交瘤细胞对细胞密度的依赖性。
RF-48细胞,ATCC细胞常用的饲养细胞有胸腺细胞、正常脾细胞和腹腔巨噬细胞。其中以小鼠腹腔巨噬细胞的来源及制备较为方便,且有吞噬清除死亡细胞及其碎片的作用,因此使用最为普遍。其制备方法如下:
按上述采小鼠脾细胞的方法将小鼠致死、体表消毒和固定后,用消毒剪镊从后腹掀起腹部皮肤,暴露腹膜。用酒精棉球擦拭腹膜消毒。用注射器注射10ml不完全培养基至腹腔,注意避免穿入肠管。右手固定注射器,使针头留置在腹腔内,左手持酒精棉球轻轻按腹部1分钟,RF-48细胞,ATCC细胞随后吸出注入的培养液。1000r/min离心5-10分钟,弃上清。先用5ml HAT培养基将沉淀细胞悬浮,根据细胞计数结果,补加HAT培养基,使细胞浓度为2×105/ml,备用。通常对巨噬细胞来说,96孔培养板每孔需2×104个细胞,24孔板每孔需105细胞。每只小鼠可得3-5×106个细胞,因此一只小鼠可供两块96孔板的饲养细胞。也可在细胞融合前1-2天制备并培养饲养细胞,RF-48细胞,ATCC细胞这样使培养板孔底先铺上一层饲养细胞层。做法是,将上述细胞悬液加入96孔板,每孔0.1ml(相当于2滴),然后置37℃ 6% CO2的培养箱中培养。
YB-ATCC-4074 中国仓鼠卵巢细胞 进口美国ATCC细胞株,1ml/株
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文献和实验mahaizhi 各位前辈,请教一下在国内能不能购买到ATCC的原装细胞,有没有哪家公司或者什么机构是ATCC在国内的指定代理。如果有的话,请不吝赐教联系方式。谢谢。 ddh382 我也想知道 veimojie ATCC 在中国的总代理是北京中原公司 比较放心 都是ATCC原装干冰包装发给客户 有兴趣可以去公司主页看看 网址http://www.sinozhongyuan.com/index
酶链反映法; 7、免疫学方法; 8 、支原体的培养。 对于支原体污染的细胞,可以采取补救措施: 1、抗生素排除法:可以用5-10倍于常用量的冲击法,加入高浓度抗生素后作用24-48小时,再换入常规培养液,有时可能有效。推荐用量:庆大霉素 200ug/ml ,四环素10ug/ml ,卡那霉素50ug/ml 。对于支原体污染抗生素应用,预防性应用比污染后使用好。 2、 加温除菌:根据支原体耐热性能差的特点。将受支原体污染的细胞置于41度中作用5-10小时可以杀灭支原体。但由于41度对培养细胞
,所以如果做细胞信号转导的战友要注意到这点。相关的文献可以自己到pubmed上查找。 3.完全分化的细胞不能传代,因为贴壁已经很牢固,强迫其脱离可能造成,尤其是细胞的突起断裂,细胞存活率很低。 4.用NGF刺激的24-48h后,细胞可以消化下来传代或者冻存,用于继续培养。一般这种细胞叫做NGF activated cells。用于检测待测物的NGF样活性,指标是细胞突起的程度。 5.楼上有照片贴出来细胞呈现梭形,严格讲这种细胞已经不能叫做PC12了。严肃的话最好放弃。 6.该细胞容易聚集生长,传代
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