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文献和实验PCR 扩增标记法探针标记 PCR扩增标记法的原理与普通的核酸PCR相同。即Taq DNA多聚酶以DNA为模板,在特异引物引导下,在PCR仪中合成cDNA探针。由于在反应体系中加入一定量的标记dNTP,因此扩增的同时又是一个标记过程。 cDNA探针PCR扩增法标记原理
1.PCR技术PolymeraseChainReaction聚合酶链反应它是一种模拟天然DNA复制过程,在有DNA模板、DNA聚合酶(Taq酶)、RNA引物和四种dNTP的情况下,通过高温变性(90℃-95℃,1-2min),低温退火(25℃-37℃,1-2min),中温延伸(60℃-75℃,90sec-5min),这样反复循环的过程中,在体外扩增特异性DNA片段的分子生物学技术。1)、PCR反应成分: TaqDNA聚合酶引物浓度:一般0.1-0.5μmol/LdNTP:一般为50-200μ
for both DNA sample and reaction mixture preparation, is strongly recommended.The reagents for PCR should be prepared separately and used solely for this purpose. Autoclaving of all solutions, except dNTPs, primers and Taq DNA Polymerase is recommended
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