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齐一生物
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文献和实验:Western结果通常需要提供内参作为对照,通常可以选用Tubulin抗体或Actin抗体,进行内参检测。 6. 二抗孵育(Secondary antibody inucubation): 吸尽洗涤液,立即加入稀释好的二抗,室温或4℃在侧摆摇床上缓慢摇动孵育一小时。 回收二抗。加入Western洗涤液,在侧摆摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟。吸尽洗涤液后,再加入洗涤液洗涤5-10分钟。共洗涤3次。如果结果背景较高可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。 参考二抗
the membrane at room temperature for 30 minutes with 3 or more changes of Wash Buffer. 6.Incubate the membrane at room temperature for 1 hour in Blotting Buffer containing an appropriate secondary reagent such as goat anti-mouse-HRP at 1:4000 (Catalog # HAF
Probing and Stripping of Western Blot
270 ml H2OStripping the antibody from Western Blot(Natalya Yudkovsky and Jeff Ranish)Note: these two methods both work, but the first is less time consuming:Easy Stripping Method:1. Put the blot in the following solution
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