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文献和实验Generation of a Stable Cell Line for Constitutive miRNA Expression
Here, a protocol is described to generate stable cell lines for constitutive expression of single cellular or viral miRNA precursors in absence of infection. The procedure comprises cloning of the precursor sequence, generation of the lentiviral expression vector
Robust Cell Line Development Using Meganucleases
Cell line development for protein production or for the screening of drug targets requires the reproducible and stable expression of transgenes. Such cell lines can be engineered with meganucleases, sequence-specific endonucleases
在体外培养的哺乳类动物的细胞,一般在数月中,经数十代的继代培养,则产生增殖危机(cris-is),即增殖能力显著降低,以至最后死亡,危机产生的时期,在小鼠、大鼠和仓鼠中都比较早,人胎儿二倍体成纤维细胞株可长达 50— 80代。对这样有限增殖的细胞株,通过反复更换培养液勉强加以维持,但其中部分细胞可产生变异重新获得增殖能力,成为可以继代培养的细胞,此称为确立继代细胞株(或称株化),而其细胞株则称确立细胞株。从过去沿袭下来的名称为细胞株。在建立细胞株时,常伴有染色体的变化,认为是基于广义
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