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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
1000
- 供应商:
南京森贝伽生物科技有限公司
- 检测范围:
电询
- 检测方法:
酶联免疫
- 应用:
仅供科研使用
- 标记物:
人
- 样本:
血清、血浆、细胞及相关液体
- 规格:
96T/48T
人酸性神经鞘磷脂酶(ASM)ELISA检测试剂盒产品介绍:
英文名称:Human acid sphingomyelinase, ASM ELISA Kit
货号:SBJ-H1282
规格:96T/48T
有效期:6个月
保存:2-8℃,避光保存
适用范围:仅供科研使用,不得用于临床
运输方式:快递,全国包邮(南京客户免费送货上门)
人酸性神经鞘磷脂酶(ASM)ELISA检测试剂盒使用注意事项,:
(1)试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
(2)浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
(3)各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
(4)请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
(5)封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
(6)底物请避光保存。
(7)严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
(8)所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
(9)本试剂不同批号组分不得混用。
(10)如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
ELISA试剂盒样本处理及要求:
a.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
b.血浆:应根据标本的要求选择EDTA、者柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
c.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
d.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
e.组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
人酸性神经鞘磷脂酶(ASM)ELISA检测试剂盒操作步骤
1.标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在第一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为72 pg/mL,48 pg/mL ,24pg/mL,12 pg/mL,6 pg/mL)。
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
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文献和实验musculus),如下图所示:然后我们把这个序列贴到 SOSUI 里面:然后接得到这这些结果:从这个结果我们知道这个蛋白跨膜 7 次,在胞内有两个较大的亚基,因此我们选择裂解液至少也要用 RIPA 而不能用 NP40,否则不能把这个蛋白从细胞膜里面拽出来,或者需要用专门的膜蛋白提取试剂盒来操作。选抗体的时候需要注意一下它的免疫原氨基酸序列是否是胞内的氨基酸序列,因为这样抗体识别的效果是最佳的。然后我们要计算一下 PI,可以用这个工具:输入氨基酸序列之后就得到了分子量和等电点 PI:这个信息对于我们选择哪种
因素。当人接触了猫狗粪便或食用了被虫卵污染的食物、蔬果即会被感染,虫卵进入人体并在小肠内发育成蛔蚴后,随血液系统进入肝、肺、脑部等身体的重要器官。如果蛔蚴侵犯眼睛,就会造成眼犬弓蛔虫病,诱发炎症,伤害视网膜,严重的可能因此失明。 弓蛔虫病临床表现 1.全身表现:可引起「发热、乏力、体重减轻、咳嗽、喘鸣、肝大、躯干和下肢瘙痒、皮疹和结节等」。个别患者可出现中枢神经系统受累的表现,如脑炎、脑嗜酸性粒细胞肉芽肿癫痫等。 2.眼部表现:眼部症状可有眼前黑影、视力下降等。 典型的眼部临床
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