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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 供应商:
康朗生物
- 检测范围:
见说明书
- 检测方法:
酶联免疫
- 应用:
科研
- 标记物:
见说明书
- 样本:
血清/组织/尿液
- 规格:
96T/48T
英文学名:Phosphorylation in rat AMP-activated protein kinase (AMPK) ELISA kit
科研名称:大鼠磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA试剂盒说明书
实验名称:大鼠磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)检测试剂盒
大鼠磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA试剂盒问:间接法检测抗体,大体过程如下:
包被(4度过夜),PBST洗涤,封闭(5%脱脂奶粉),洗涤,加入一抗,洗涤,加入二抗,洗涤,我设置的阴性对照就是第一步直接在孔中加100ul 包被液,没有加我的蛋白,照理说,没有蛋白最后就不应该显色,怀疑是二抗没洗涤干净所以才显色,洗涤了至少5次以上,最后还在纸上使劲拍干,但是最后还是显色,求高人指点~~(包被液是碳酸盐缓冲液,稀释液assay buffer: PBS:KH2PO4,Na2HPO4.12H2O,NaCL,KCL,Tween-20,我的一抗二抗都是用这个稀释液配的,封闭液也是用稀释液配的脱脂奶粉,没有血清啊)
大鼠磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA试剂盒答:
1.可能封闭效果不好
2可能封闭液脱脂奶粉可以和一抗交叉反应
3.一抗没有洗涤干净
4.加样时操作出现错误。
大鼠磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA试剂盒先确定封闭有没有问题,洗的话二抗确实多洗几遍没错,没有洗板机,每次洗可以摇晃板子,每遍1-2分钟,也可以多设置几个阴性孔,观察结果,看是不是没洗干净的问题。加样尽量加到底部,避免沾壁!
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