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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
1000
- 供应商:
南京森贝伽生物科技有限公司
- 检测范围:
电询
- 检测方法:
酶联免疫
- 应用:
仅供科研使用
- 标记物:
人
- 样本:
血清、血浆、细胞及相关液体
人抗环胍氨酸肽抗体(CCP)ELISA检测试剂盒产品介绍:
英文名称:Human anti-cyclic citrullinated peptide,CCP ELISA Kit
货号:SBJ-H0776
规格:96T/48T
有效期:6个月
保存:2-8℃,避光保存
适用范围:仅供科研使用,不得用于临床
运输方式:快递,全国包邮(南京客户免费送货上门)
人抗环胍氨酸肽抗体(CCP)ELISA检测试剂盒使用注意事项,:
(1)试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
(2)浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
(3)各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
(4)请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
(5)封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
(6)底物请避光保存。
(7)严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
(8)所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
(9)本试剂不同批号组分不得混用。
(10)如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
ELISA试剂盒样本处理及要求:
a.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
b.血浆:应根据标本的要求选择EDTA、者柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
c.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
d.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
e.组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
人抗环胍氨酸肽抗体(CCP)ELISA检测试剂盒操作步骤
1.标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在第一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为72 pg/mL,48 pg/mL ,24pg/mL,12 pg/mL,6 pg/mL)。
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
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文献和实验人抗环瓜氨酸肽抗体(CCP ) 酶联免疫分析( ELISA ) 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中抗环瓜氨酸肽抗体(CCP )含量。 实验原理: 本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中人抗环瓜氨酸肽抗体( CCP )水平。用纯化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被单抗的微孔中依次加入抗环瓜氨酸肽抗体( CCP ),再与 HRP 标记的抗原
特异性接近90%。瓜氨酸肽可以有关节滑膜组织的B细胞产生,并能在关节滑液中检测出来。 一、抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体是什么? 抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体是类风湿性关节炎患者体内中出现的针对瓜氨酸抗原的自身抗体,是早期诊断类风湿性关节炎(RA)的重要指标之一。对早期类风湿性关节炎诊断具有较好的特异性,指标越高患类风湿的可能性也越大。 抗CCP抗体所针对的靶抗原是上皮细胞分化的终末阶段的细胞骨架成分Filaggrin上的主要抗原决定簇。目前
人、其它自身免疫性疾病、肝炎、结核等疾病。RF阴性并不能排除RA的诊断,约30%的早期RA患者RF为阴性。所以单纯依靠常规风湿四项检测对于RA作出早期诊断并指导临床治疗还远远不够。近年来形成了一些敏感性和特异性都非常高的RA诊断技术,如抗环瓜氨酸肽抗体(CCP)检测、抗角蛋白抗体(AKA)检测、抗RA33/RA36抗体检测、抗Sa抗体检测、抗核周因子抗体检测等。以上抗体中两项同时阳性者RA的可能性高达91.3%。其中,抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体检测对早期RA诊断的敏感性和特异性高,是目前最常用的早期
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