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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 规格:
100 µg
蛋白名称:Smad5蛋白, Smad5 protein
蛋白构建:A DNA sequence encoding the mouse SMAD5 (P97454) (Thr2-Ser465) was expressed with the N-terminal polyhistidine-tagged GST tag at the N-terminus.
表达宿主:Baculovirus-Insect Cells
蛋白纯度:> 90 % as determined by SDS-PAGE
蛋白活性:0
蛋白内毒素:< 1.0 EU per μg of the protein as determined by the LAL method
预测N端:Met
蛋白分子量:The recombinant mouse SMAD5/GST chimera consists of 701 amino acids and has a calculated molecular mass of 79.9 kDa. The recombinant protein migrates as an approximately 75-88 kDa band in SDS-PAGE under reducing conditions.
蛋白NP号:P97454
蛋白氨基酸序列:Thr2-Ser465
蛋白标签:N-GST & His
蛋白保存条件:Store it under sterile conditions at -20℃ to -80℃. It is recommended that the protein be aliquoted for optimal storage. Avoid repeated freeze-thaw cycles.
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文献和实验蛋白纯化的方法很多,如层析法、电泳法、超离心法、超滤等,其中蛋白质亲和层析法通常只需要一步操作便能将目标蛋白从混合物中分离出来,且纯度很高,因而备受实验者的青睐。 在进行蛋白表达时,选择合适的标签有利于蛋白的纯化,促进蛋白的可溶性,因此了解几种常用的蛋白纯化标签很重要。一般来说,常用的蛋白纯化标签主要有 His tag、GST tag、MBP tag、NusA tag、Strep tag 等,那么这些蛋白纯化标签有什么不同之处呢? His tag(组氨酸标签) 融合蛋白是目前最常用的表达
HIS 标签蛋白纯化效果不理想,宝宝心里苦呀。今天,小编来跟大家一起找找原因。 纯化所得组分中没有收集到重组的 HIS 标签蛋白。该问题主要可以分为以下两个方面: 1、HIS 标签蛋白没有结合到填料上就流穿了 原因一 超声的功率不对。超声功率过高,容易导致蛋白炭化;功率过低,蛋白释放不出来。 建议 改变超声功率,同时可以在超声前加入溶菌酶。 原因二 结合缓冲液条件不合适。 建议 检查结合缓冲液中是否有影响结合的因素,如:金属离子螫合剂、强还原剂、过高的咪唑浓度。同时,优化缓冲
)时。这有助于研究低丰度蛋白质和优化难以表达的蛋白质项目。它也是一个很好的纯化标签。FLAG 序列还含有肠激酶切割位点,如果标签位于 N 端,切除后不留多余的残基。谷胱甘肽 S - 转移酶(GST)GST 是最早被使用的表位标签之一;它可以置于 N 或 C 端并可以蛋白质的可溶表达。用谷胱甘肽结合树脂进行纯化。绿色荧光蛋白(GFP)在表位标签中独一无二,GFP 是一种自发荧光的 27 kDa 标签,可通过荧光显微镜直接在活细胞中检测到。血凝素 A(HA)HA 来自流感血凝素蛋白的结合结构域,含有高
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