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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 规格:
100 µg
蛋白名称:CD59蛋白, CD59 protein
蛋白构建:A DNA sequence encoding the rat CD59 (P27274) (Met1-Asn100) was expressed, fused with a polyhistidine tag at the C-terminus.
表达宿主:HEK293 Cells
蛋白纯度:> 95 % as determined by SDS-PAGE
蛋白活性:0
蛋白内毒素:< 1.0 EU per μg of the protein as determined by the LAL method
预测N端:Leu 23
蛋白分子量:The recombinant rat CD59 /Fc comprises 89 amino acids and has a predicted molecular mass of 10.3 kDa. The apparent molecular mass of the protein is approximately 17 kDa in SDS-PAGE under reducing conditions.
蛋白NP号:P27274
蛋白氨基酸序列:Met1-Asn100
蛋白标签:C-His
蛋白保存条件:Store it under sterile conditions at -20℃ to -80℃. It is recommended that the protein be aliquoted for optimal storage. Avoid repeated freeze-thaw cycles.
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文献和实验或者互作蛋白复合物(红色+黄色)洗脱 Step 5:分析检测—Western Blot 或者质谱 常用“黑话” 以上示例图证明了 EDR1 和 EDR4 有相互作用。如果想要设计好实验,先清楚以下常用“黑话”含义。 阳性对照:证实细胞裂解物中确实存在靶蛋白(IP)或者互作蛋白对(co-IP,比如诱饵蛋白X和靶蛋白 Y),即为常说的 input。可直接取抽好的蛋白溶液进行 Western。 阴性对照:用来排除假阳性。IP/co-IP 后靶蛋白或者互作蛋白对都检测到了,固然是值得高兴
DNA(经PI-SceⅠ和I-CeuⅠ预消化为线形DNA)连接。为了提高筛选效率,用SwaⅠ酶切连接产物以除去自身环化或者其他可能存在的非线性的腺病毒DNA(SwaⅠ酶切位点在环状Adeno-X病毒DNA的PI-SceⅠ和I-CeuⅠ位点之间)。用此DNA转化大肠杆菌DH5α并筛选重组子。最后,用重组腺病毒DNA转染HEK 293病毒包装细胞系。由于从Adeno-X病毒DNA中删除了E1基因,使其无法感染细胞,这一步需要用HEK 293包装细胞提供反式的E1蛋白,即可得到含有目的基因、有感染能力的重组腺病
冻存于-20°C.样品采用蛋白酶K处理可使相邻肽段剪切成羧基团的芳香族氨基酸和脂肪族氨基酸。蛋白质和DNA之间的交联通过DNA的纯化被打断。3检测DNA浓度,取5ul纯化的DNA到995ulTE中得到一个原溶液的200倍稀释测其OD260。那么DNA的浓度就为OD260x10,000.μg/ml。这样就可计算出染色质制品的DNA浓度。4 免疫共沉淀1 从2.2得来的染色质制品,推荐每个IP样品都采用25ug的DNA的量。每个样品按1:10的量加入RIPA溶液。需要一个样本作为空珠子的对照。2在除空
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