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- SBJ-H0546
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
1000
- 供应商：
南京森贝伽生物科技有限公司
- 检测范围：
电询
- 检测方法：
酶联免疫
- 应用：
仅供科研使用
- 标记物：
人
- 样本：
血清、血浆、细胞及相关液体
人P27蛋白(P27)ELISA检测试剂盒，南京森贝伽生物科技有限公司有售，我司销售的ELISA试剂盒灵敏度高、效果稳定、实验效果好且提供免费代测服务。公司专业致力于研发和生产、生化试剂、科研原料药、医药中间体、精细化工、天然提取化合物等国产、进口中高端试剂产品品牌。同时还拥有安全、快捷、准确的物流配送体系，及时满足客户的实验需求，欢迎广大客户电话订购人P27蛋白(P27)ELISA检测试剂盒！
人P27蛋白(P27)ELISA检测试剂盒产品介绍：
英文名称：Human P27 protein ELISA Kit
货号：SBJ-H0546
规格：96T/48T
有效期：6个月
保存：2-8℃,避光保存
适用范围：仅供科研使用,不得用于临床
运输方式：快递，全国包邮（南京客户免费送货上门）
人P27蛋白(P27)ELISA检测试剂盒使用注意事项,：
(1)试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
(2)浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
(3)各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
(4)请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。
(5)封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
(6)底物请避光保存。
(7)严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
(8)所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
(9)本试剂不同批号组分不得混用。
(10)如与英文说明书有异，以英文说明书为准。
ELISA试剂盒样本处理及要求：
a.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
b.血浆：应根据标本的要求选择EDTA、者柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
c.尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
d.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
e.组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。
人P27蛋白(P27)ELISA检测试剂盒操作步骤
1.标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在第一、第二孔中分别加标准品100μl，然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为72 pg/mL，48 pg/mL ，24pg/mL，12 pg/mL，6 pg/mL）。
2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。
5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7.温育：操作同3。
8.洗涤：操作同5。
9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
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货号：SBJ-H0546
规格：96T/48T
有效期：6个月
保存：2-8℃,避光保存
适用范围：仅供科研使用,不得用于临床
运输方式：快递，全国包邮（南京客户免费送货上门）
人P27蛋白(P27)ELISA检测试剂盒使用注意事项,：
(1)试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
(2)浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
(3)各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
(4)请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。
(5)封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
(6)底物请避光保存。
(7)严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
(8)所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
(9)本试剂不同批号组分不得混用。
(10)如与英文说明书有异，以英文说明书为准。
ELISA试剂盒样本处理及要求：
a.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
b.血浆：应根据标本的要求选择EDTA、者柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
c.尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
d.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
e.组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。
人P27蛋白(P27)ELISA检测试剂盒操作步骤
1.标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在第一、第二孔中分别加标准品100μl，然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为72 pg/mL，48 pg/mL ，24pg/mL，12 pg/mL，6 pg/mL）。
2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。
5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7.温育：操作同3。
8.洗涤：操作同5。
9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
人P27蛋白(P27)ELISA检测试剂盒其它相关产品，欢迎来电订购：
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货号SBJ-H1842Humanfilamentoushemagglutinin,FHAELISAKit人丝狀血球凝集素(FHA)ELISA试剂盒96T/48TELISA.
货号SBJ-P197芜菁花叶病毒96T/48TELISA.
货号SBJ-H0841humanproviralintegrationsite1,Pim1ELISAKit人前病毒整合位点1(Pim1)ELISA试剂盒96T/48TELISA.
货号SBJ-H1843Humancytovillin/ezrin,CVLELISAKit人细胞绒毛蛋白/埃兹蛋白(CVL)ELISA试剂盒96T/48TELISA.
货号SBJ-P198Dolichosbifowsagglutinin,DBAELISAKit双花扁豆凝集素(DBA)ELISA试剂盒96T/48TELISA.
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文献和实验相关实验
Procedure Dilute p27 monoclonal antibody 1:1000 (v/v) in Carbonate Coating Buffer. Add 100 µl/well and incubate o/n @ 4°C or 1 hr @37°C. Wash 3X with TBST (pour onto plate, empty into sink, hit onto towel 3x to clear wells
Mouse p27 PCR Using Gitschier Buffer
Mutant allele: Neo-1 primer (CCTTCTATCGCCTTCTTG), plus mgK-3 primer (TGGAACCCTGTGCCATCTCTAT) produce a 0.5kB PCR product. Wildtype allele: mgK-3 (above) plus mcK-5 (GAGCAGACGCCCAAGAAGC) produce ~1kB product. Stock Solutions
Q：Annexin V 凋亡检测试剂盒的原理是什么？ A：Annexin V 是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白，与磷脂酰丝氨酸 PS 有高度亲和力，可通过细胞外侧暴露的 PS 与凋亡早期细胞胞膜结合，将 Annexin V 标记荧光染料如 FITC 利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡。 碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)或 7-AAD 可与双链 DNA 特异性结合，并产生强烈的荧光，正常情况下无法透过细胞膜。由于凋亡晚期或坏死细胞膜丧失完整性，核染料 PI 或 7-AAD
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