人前蛋白转化酶枯草溶菌素9（PCSK9）ELISA试剂盒

人前蛋白转化酶枯草溶菌素9（PCSK9）ELISA试剂盒产品规格：96T/48T
产品库存：现货
产品价格：询价
使用范围：仅供科研检测,不得用于临床.
保存条件：2-8℃
发货方式：专门快递免费送货上门
产品价格：价格优惠,欢迎来电洽谈！
说明书:说明书随货发送,您也可以直接联系我司在线销售人员索取.全国热线：400-991-0197代理多种品牌进口原装、分装“ELISA试剂盒”.齐一生物科技有限公司作为酶联免疫供应商,凭借精湛的技术,全方位的售前,售中,售后免费代测服务,共同铸就高品质的产品.多年专业酶免服务,质量保证,可免费提供代测服务,一周内出结果.欢迎来电咨询订购.
ELISA试剂盒操作步骤
ELISA试剂盒使用前,将所有试剂充分混匀.不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差.
根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数.每个标准品和空白孔建议做复孔.每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔.标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内.
加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内.立即加入50ul的生物素标记的抗体.盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时.
甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干.重复此操作3次.如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次.
每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟.
甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干.重复此操作3次.如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次.
每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟.避免光照.
取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果.
在450nm波长处测定各孔的OD值.
ELISA操作步骤
酶联免疫吸附实验材料,试剂,溶液
1．酶标板,100μltip头,1mlEp管,湿盒
2．包被稀释液（0.05mol/L碳酸钠-碳酸氢钠buffer,pH9.6）
碳酸钠0.15g,碳酸氢钠0.29g,叠氮钠0.02g,加双蒸水至100ml,调至pH9.6
3.封闭液(5%小牛血清/PBS溶液)
小牛血清5ml,1*PBS(pH7.4)95ml
4.洗涤液(PBST,pH7.4)
NaCl0.8g,KH2PO40.02g,Na2HPO4.12H2O0.29g,KCl0.02g,Tween200.05ml,叠氮钠0.01g,加双蒸水至100ml,调至pH7.4
5.样本稀释液(PBS,pH7.4)
NaCl0.8g,KH2PO40.02g,Na2HPO4.12H2O0.29g,KCl0.02g,叠氮钠0.01g,加双蒸水至100ml,调至pH7.4
6.酶标第2抗体(羊抗兔)稀释范围1:5,000-1:100,000
7.底物液(TMB-过氧化氢尿素溶液)
①底物液A:TMB20mg,无水乙醇10ml,加双蒸水至100ml.
②底物液B(0.1mol/L柠檬酸-0.2mol/L磷酸二氢钠缓冲液,pH5.0-5.4)
Na2HPO41.46g,柠檬酸0.933g,0.75%过氧化氢尿素0.64ml,加三蒸水至100ml,调至pH5.0-5.4
③底物A和B按1:1混合即成TMB-过氧化氢尿素溶液.
8.终止液(2mol/LH2SO4溶液)双蒸水200ml,浓硫酸34ml,(缓慢滴加并不断搅拌),加双蒸水至300ml9.0.9%生理盐水

人前蛋白转化酶枯草溶菌素9（PCSK9）ELISA试剂盒操作步骤:
1.包被过程(注意设置空白对照,阴性对照):
将所用抗原用包被稀释液稀释到适当浓度(一般所需抗原包被量为每孔20-200μg),每孔抗原加入100μl,置37℃,4h,或4℃,24h;弃去孔中液体.(为避免蒸发,板上应加盖或将板平放在底部有湿纱布的金属湿盒中)
2.封闭酶标反应孔:
5%小牛血清置37℃封闭40min.封闭时将封闭液加满各反应孔,并去除各孔中的气泡,封闭结束后用洗涤液满孔洗涤3遍,每遍3min.
洗涤方法:吸干孔内反应液,将洗涤液注满板孔,放置2min略作摇动,吸干孔内液,倾去液体后在吸水纸上拍干
洗涤次数3次
3.加入待检测样品(建立合适的浓度梯度):
检测时一般采用1:50-1:400的稀释度,应采用较大稀释体积进行,一般保证样品吸取量>20μl.
将稀释好的样品加入酶标反应孔中,每样品至少加双孔,每孔100μl,置于37℃,40-60min.用洗涤液满孔洗涤3遍,每遍3min.
4.加入酶标抗体:
酶标抗体:根据酶结合物提供商提供的参考工作稀释度进行.37℃,30-60min之间.短于30min往往结果不稳定.每孔加100μl.洗涤同前.
5.加入底物液(现用现配):
TMB-过氧化氢尿素溶液,OPD-过氧化氢底物液系统次之.
底物加入量:每孔100μl,置37℃避光放置3-5分钟,加入终止液显色.
6.终止反应:
每孔加入终止液50μl终止反应,于20min内测定实验结果.
7.结果判断:
OPD显色后采用492nm波长,TMB反应产物检测需要450nm波长.检测时一定要首先进行空白孔系统调零.用测定标本孔的吸收值与一组阴性标本测定孔平均值的比值(P/N)表示,当P/N大于2时作为抗体的效价.(数值的大小依具体检测要求而定.)
人前蛋白转化酶枯草溶菌素9（PCSK9）ELISA试剂盒其它产品
人组织细胞淋巴瘤细胞 U-937
人纤维肉瘤细胞 HT1080
人胚肾细胞 AD293
人涎腺腺样囊性癌细胞 ACC3
人结直肠腺癌上皮细胞 DLD-1
人弥漫性大细胞淋巴瘤B淋巴细胞 Pfeiffer
人肝癌亚力山大细胞 PLC/PRF/5
人肝癌细胞 QGY-7703
人肝癌细胞 SMMC-7721
人肝癌细胞 SK-HEP-1
人急性成淋巴细胞性白血病细胞 CCRF-CEM
人膀胱移行细胞癌细胞 T24
人神经母细胞瘤细胞 SH-SY5Y
人子宫颈鳞癌细胞 SiHa
人肝细胞 L-02（HL-7702）
人肝癌细胞 Huh-7
人膀胱癌细胞 5637
人膀胱癌细胞 BIU-87
人膀胱癌细胞 EJ
人舌鳞状上皮细胞癌 CAL-27
人卵巢癌细胞 A2780
人结肠癌细胞 HCT 116
人肝癌细胞 BEL-7402
人结肠癌细胞 HT-29
人非小细胞肺癌细胞 NCI-H1299
人卵巢癌细胞 3AO
人肾癌细胞 A498
人恶性横纹肌肉瘤 PLA-802
人脑星形胶质母细胞瘤细胞 U-87 MG [U87MG；U87 MG]
人T淋巴瘤细胞 H9
人肾透明细胞腺癌细胞 786-O
人膀胱上皮永生化细胞 SV-HUC-1
人乳腺癌细胞 MX-1
人胃癌细胞 MGC-803 [MGC803]
人胃癌细胞（低分化） BGC-823 [BGC823]
人淋巴瘤细胞 CA46
表达SV40T抗原人胚肾上皮细胞 293FT
人肺鳞癌细胞系 NCI-H226
人慢性骨髓性白血病细胞系 K562
人舌癌细胞 Tca-8113
人胚肾上皮包装细胞 GP2-293
高转移人肝癌细胞 LM3
高转移人肝癌细胞 MHCC97-H
低转移人肝癌细胞 MHCC97-L
人肾小管上皮细胞系 HK-2
人子宫内膜腺癌细胞 HEC-1-A
人子宫内膜腺癌细胞 HEC-1-B
人Ishikawa子宫内膜癌细胞 ISK
人子宫内膜腺癌细胞 AN3CA
人神经母细胞瘤细胞 IMR-32
人皮肤成纤维细胞 HSF
人Burkitt淋巴瘤细胞 RAJI
人B淋巴细胞急性白血病细胞 BALL-1
人宫颈癌细胞 Hela-s3
人卵巢癌细胞 HO-8910
人肾小球系膜细胞 HMC
人小细胞肺癌细胞 NCI-H446
人骨髓瘤细胞/人浆细胞白血病细胞 NCI-H929
人胚肺成纤维细胞 HELF
人饲养层上皮细胞 HPT-8