人免疫球蛋白M（IgM）ELISA试剂盒

人免疫球蛋白M（IgM）ELISA试剂盒齐一生物科技（上海）有限公司产品已被广泛应用于化学、化工、生命科学的基础研究和开发应用、制药、疾病诊断与控制、人口与健康、生物技术等诸多领域.客户遍布国内各大学、研究所、医院、卫生防疫、商品检验检疫、制药公司、生物技术公司和食品工业等单位.齐一生物科技（上海）有限公司客服热线：021-60348496.Web:www.qiyibio.com
齐一生物主要经营进口原装Elisa试剂盒全国热线：400-991-0197,种类齐全,价格实惠,购买齐一生物产品的新老客户,可享免费代测实验服务,可检测人源,小鼠,大鼠,猪,狗,猴,兔,羊,鸡,牛,鸭子,鱼,植物等各种样本.全程提供技术支持.如需其他Elisa试剂盒说明书及报价,可来电咨询齐一生物.
特点
一、高效、灵敏、特异的抗体；
二、稳定的重复性和可靠性；
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体；
四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型；
五、节省实验经费.
人免疫球蛋白M（IgM）ELISA试剂盒elisa试剂盒回收率是反应待测物在样品分析过程中的损失的程度,损失越少,回收率越高,如果作标液1PPM,就是1毫克/升,而作出标准数据为0.99毫克/升,就是说你的回收率是99%,这个与真实成分有密切的关系,说明方法的准确度.比如水中总无机氯含量测定,样品水中含有无机氯20mg/L,取100mL被测水样品,加入0.1mL浓度为10mg/mL的含无机氯标准样品,测定时忽略体积变化,如果测定出样品中无机氯为2.98mg/L,则认为回收率为99%.
制备方法
包括以下步骤：
1)抗原表位的计算机筛选；
2)抗原的制备；
3)血清的采集；
4)间接ELISA方法的建立；
5)间接ELISA方法的敏感性和特异性验证；
6)试剂盒的稳定性验证；
7)对屠宰场进行临床检测.该方法简单、快速、灵敏度高、特异性强、稳定性合格、重复性好.应用本发明制得的试剂盒能有效检出感染猪的戊型肝炎病毒,适用于大批量发病样本的检测,可用于猪戊肝的快速诊断,并预防、控制猪戊肝病毒的流行和阻断戊肝病毒由猪向人传播.
组成结构
1、血清：操作过程中避免任何细胞刺激.使用不含热原和内毒素的试管.收集血液后,1000×g离心10分钟将血红细胞迅速小心地分离.
2、血浆：EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测.1000×g离心30分钟去除颗粒.
3、细胞上清液：1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物.
4、组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎.1000×g离心10分钟,取上清液.
5、保存：如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻.尽可能的不要使用溶血或高血脂血.如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤.不要在37℃或更高的温度加热解冻.应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻.
此IBL试剂盒能用于小鼠血清,EDTA血浆,细胞上清中产品定量检测试剂盒成分
1预包被板:抗小鼠白介素-6兔子IgG,亲合纯化96T
2酶标记抗体:(30倍浓缩)HRP标记抗小鼠白介素-6兔子IgG,亲合纯化0.4mLx1
3标准品:重组小鼠白介素-60.5mLx2
4EIA缓冲液:含1%BSA,0.05%吐温20BPS30mLx1
5标记抗体稀释液:含1%BSA,0.05%吐温20BPS12mLx1
6显色剂:TMB底物液15mLx1
7终止液:1N硫酸12mLx1
8浓缩洗涤液:(40倍浓缩)含1%BSA,0.05%吐温20BPS50mLx1操作说明1实验所需器材(但试剂盒没有提供)酶标仪(450nm)微移液管及其吸嘴量筒及烧杯去离子水冰箱(4°C)坐标纸(log/log)吸水纸试管(用于标准品稀释)温育箱(37°C±1°C)洗瓶(用于洗板)一次性试剂管(用于浓缩酶标记抗体和显色剂)
操作方法
双抗体夹心法
1.包被：用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1～10μg/ml.在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃隔夜.次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟.（简称洗涤,下同）.
2. 加样：加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时.然后洗涤.（同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔）.
3. 加酶标抗体：于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体（经滴定后的稀释度）0.1ml.37℃孵育0.5～1小时,洗涤.
4. 加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10～30分钟.
5. 终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml.
6. 结果判定：可于白色背景上,直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示.也可测OD值：在ELISA检测仪上,于450nm（若以ABTS显色,则410nm）处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性.
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