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人胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)ELISA试剂盒

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  • 上海
  • QY-H10116
  • 2025年07月08日
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      563

    • 供应商

      齐一生物科技(上海)有限公司

    • 检测范围

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    • 检测方法

      ELISA酶联免疫法

    • 应用

      科研检测

    • 标记物

      见说明

    • 样本

      血清,血浆,尿液,胸腹水,脑脊液,细胞培养上清,组织匀浆等

    • 规格

      48T/96T

    人胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)ELISA试剂盒齐一生物科技(上海)有限公司是一家专业生产和销售各种化学试剂,生化试剂,医药中间体,标准品和对照品的大型化学科技公司.自公司成立以来,本着始终拥有的创业激情,公司的销售额保持高速增长,企业规模不断扩大.齐一生物科技(上海)有限公司客服热线:021-60348496.Web:www.qiyibio.com
    3 试剂盒组成
    3.1 预包被的AFB1偶联抗原的可拆酶标板:1块(12孔×8条)。
    3.2 AFB1标准品:6瓶(1ml/瓶),含量分别是: 0 ng/ml,0.1 ng/ml,0.3 ng/ml,0.9 ng/ml,2.7 ng/ml,8.1 ng/ml。
    3.3抗AFB1抗体酶结合物:1瓶(6ml)。
    3.4显色液A:1瓶(6ml)。
    3.5显色液B:1瓶(6ml)。
    3.6终止液:1瓶(6ml),2M硫酸。
    3.7样本稀释液:1瓶(10×, 6ml),用于样品稀释用。
    3.8浓缩洗涤液:1瓶(20×,20ml),用于洗板。
    3.9说明书一份。
    4 需要而未提供的材料
    4.1 设备
    4.1.1波长450nm酶标仪。
    4.1.2粉碎机。
    4.1.3量筒。
    4.1.4振荡器。
    4.1.5漏斗。
    4.1.6Whatman No 1或相当的滤纸。
    4.1.7微量移液器。
    4.2 试剂
    4.2.1去离子水或蒸馏水。
    4.2.2 甲醇。
    5 贮存
    5.1 试剂盒贮存于2~8℃,切勿冷冻
    5.2 未用完的微孔板应该密封干燥保存
    6人胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)ELISA试剂盒 注意事项
    6.1 使用试剂盒前请仔细阅读说明书。
    6.2 不要使用过期试剂盒。
    6.3 试剂盒使用前,将试剂恢复至室温(25±2℃),建议至少回温2小时。
    6.4 标准品中含有本产品试剂,使用时应特别注意,操作时应带手套。
    6.5 终止液中含有硫酸,使用时防止灼伤皮肤及腐蚀衣物。
    6.6 不同标准品、样品所用吸头不能混用,否则会影响试验结果。
    6.7 不同批号试剂盒中的试剂不得混用;不同标准品、样品所用吸头不得混用,否则会影响实验结果。
    6.8 稀释样本时必须用本试剂盒中的样本稀释液,否则会影响实验结果
    6.9 混合试剂时应避免起泡。
    7 工作液准备
    7.1 AFB1标准品溶液:0ng/ml,0.1ng/ml ,0.3 ng/ml,0.9 ng/ml,2.7 ng/ml,8.1ng/ml
    7.2 浓缩洗涤液:用蒸馏水按1:20(1+19)稀释备用
    7.3 样本稀释液:用蒸馏水按1:10(1+9)稀释备用
    7.3 显色剂:已备用,避免光线直照
    7.4 反应终止液:已备用
    8 样品处理程序(样品在提取过程中,要严格按说明书操作,提取过程中应准确稀释,否则会出现结果不准确,样品应当保存在阴凉避光之处及冷藏保存)
    8.1取10g粉碎的样品,加 20ml 70%甲醇溶液
    8.2强力振荡3分钟
    8.3用Whatman No 1滤纸过滤
    8.4取100µl处理后的样品,加入400µl样本稀释液
    8.5取50μl稀释液进行分析(稀释倍数10)
    9 酶免分析步骤
    9.1 实验须知
    9.1.1 实验开始前请将所有试剂于盒外充分恢复至室温(25±2℃),时间约2小时。回温至室温(25±2℃)后再取出微孔条,多余的微孔条重新密封立即于2~8℃干燥保存
    注:一定保证回温充分,否则影响检测的度和准确度。
    9.1.2 使用后请立即将试剂放回2~8℃保存
    9.1.3 请不要改变分析程序
    9.1.4 请使用的微量移液器
    9.1.5 操作一旦开始,请不要中断任何程序
    9.1.6 ELISA结果的可重复性极大程度的取决于操作程序,请严格按照要求操作
    9.1.7 为避免交叉污染,每个标准品和样品均应使用不同的吸头加样
    9.1.8 加样时请勿让吸头接触微孔中的溶液或内表面
    9.2 分析步骤
    9.2.1 预先进行编号,标记B0、标准品和样品的位置,推荐进行双孔检测
    9.2.2 取所需数量的微孔(微孔条可拆),将多余板条重新密封并立即放回2~8℃保存
    9.2.3 样品稀释液(10×)、浓缩洗涤液(20×)稀释成工作液(蒸馏水或去离子水稀释)
    9.2.4 在B0孔中加入50µl0.0 ng/ ml标准品溶液
    9.2.5 在各标准孔中加入50μl的标准品溶液
    9.2.6 在各样品孔中加入50µl样品溶液
    9.2.7 在所有孔中加入50µl的抗本产品抗体酶结合物
    9.2.8 轻轻晃动反应板几秒钟。
    9.3 37℃温浴30min (温浴过程中不时轻拍反应板,可以减少双孔误差)
    9.3.1 甩掉孔中液体,用洗液洗涤微孔板5次,最后一次应在吸水纸上拍打以完全除去孔中液体。
    9.4 反应
    9.4.1 洗涤程序完成后,立即用微量移液器在每个微孔中先加入50µl显色液A,再加 50µl显色液B;轻微晃动反应板使之彻底混匀
    9.4.2 37℃温浴10min
    9.4.3 每孔中加入50µl终止液,混匀
    9.4.4 在450nm下检测吸光度,结果在5min内读取。
    10 结果计算
    10.1定量分析
    10.1.1所获得的每个浓度标准溶液和样本吸光度值的平均值(B)除以第一个标准(0标准)的吸光度值(B0)再乘以100%,即百分吸光度值。
    B—标准溶液或样本溶液的平均吸光度值
    B0—0 ng/ml标准溶液的平均吸光度值
    10.1.2以本产品浓度的对数值为X轴,百分吸光度值为Y轴,绘制标准曲线图。根据样品百分吸光度值,可从曲线上得到对应点的横坐标,即为AFB1浓度的对数值,求得反对数即为测定液中AFB1浓度C(ng/ml)
    10.1.3由于样品经过了预先稀释,因此根据标准曲线所得出的样品浓度一定要再乘以其稀释倍数。
    10.2 半定量测定
    10.1.1目测半定量测定:首先选择一个适当的标准液与样品同运行,根据样品与标准品吸光度值的高低比较,判断样品浓度值是小于还是大于标准值。
    10.1.2仪器半定量测定:首先选择一个适当的标准液与样品同运行,根据样品与标准品颜色深浅比较,判断样品浓度值是小于还是大于标准值。
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