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齐一生物
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50mg
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文献和实验的?声明:本次操作基于我司最近正在使用的 HT7700;1、送样要求:样品尽可能浓,颗粒浓度 1.0E+10;2、拍摄规范:样品以茶托状(有明显凹陷的)球形,椭球形或扁圆形,尺寸在 30-150nm,有双层膜结构的颗粒为目标进行拍摄;照片以轮廓清晰,分辨率高,焦距合适(既没有过焦的虚影,也没有欠焦的黑边),背景杂质少,明暗适宜,颗粒居中,整体美观为佳;默认拍摄 100nm 一张,200nm 三张,500nm 一张;注:铜网中样品焦距无法调清时以调试后的最佳结果拍摄,样品中无特征明显的颗粒或无颗粒时
体蛋白鉴定,即 CD9、TSG101。WB 结果如下(点样顺序从左至右分别为 Marker、外泌体-1、外泌体-2、外泌体-3、外泌体-4、外泌体-5、外泌体-6、脑样本、293T 阳性样本): 图三 WB 鉴定肿瘤组织外泌体蛋白 marker 从 WB 结果可以看出,由于外泌体 1-6 样本是取不同重量的肿瘤组织提取的外泌体,得到的外泌体量不同,所以 WB 呈现的条带深浅不一样。CD9 和 TSG101 在外泌体样本中呈现阳性结果(根据最右边的阳性条带可以判断大小基本相似),符合外泌体的蛋白特征
都可以保证无菌。如果试剂需要自己用干粉配制,那么在配制中需要严格按无菌操作进行。另外每次试剂配制量不宜过多,比如完全培养基建议以一到两周内用完为宜。试剂在分装时可以考虑再用针头式过滤器过滤一次,减少污染的可能性。如果所用移液器吸头是散装的,则注意在将吸头装入吸头盒时需要带手套,因为灭菌时无法完全去除吸头上可能粘附的油脂和其他杂质。 其次,安全柜每次使用前需要紫外照射30min灭菌,然后通风5min以上保证换气到位。每次处理细胞前应将实验需要的各种试剂、耗材备齐,尽量减少细胞处理过程中的来回
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