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文献和实验是接头引物处于“Y”接头的2个分叉单链上,序列与接头一样,只有与特异引物引导合成了接头的互补序列后,接头引物才能退火参与扩增,流程如图4。 方卫国等尝试将YADE法引入到昆虫病原真菌的分子生物学研究,并取得了成功,建立了适合于球孢白僵菌和金龟子绿僵菌YADE体系。在已克隆的类球孢白僵菌类枯草杆菌蛋白酶基因CDEP-1的基础上,利用YADE法,克隆到该基因的启动子CDEPP。 先酶切球孢白僵菌基因组DNA ,然后与“Y”形接头相连,取连接产物做模板,先以基因
与接头一样,只有与特异引物引导合成了接头的互补序列后,接头引物才能退火参与扩增,流程如图4。 方卫国等尝试将YADE法引入到昆虫病原真菌的分子生物学研究,并取得了成功,建立了适合于球孢白僵菌和金龟子绿僵菌YADE体系。在已克隆的类球孢白僵菌类枯草杆菌蛋白酶基因CDEP-1的基础上,利用YADE法,克隆到该基因的启动子CDEPP。 先酶切球孢白僵菌基因组 DNA,然后与“Y”形接头相连,取连接产物做模板,先以基因特异引物1做线性扩增,再以线性扩增产物为模板,以接头引物和基因特异引物2做指数
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