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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 供应商:
QYBIO
- 检测范围:
详细请见说明书
- 检测方法:
elisa酶联免疫分析法
- 应用:
科研检测
- 样本:
用于测定组织及相关样本
- 规格:
48T/96T
试剂盒规格:96T/48T
包装:盒
保质期:六个月
产品保存条件:2-8°C
应用范围:仅供科研研究实验使用!
植物组织样本的前处理
一、匀浆介质
一般采用磷酸盐缓冲液(0.1mol/L pH 7.4)或生理盐水(0.86%或 0.9%),客户可根据样本及测
定指标的情况自行设定浓度,目的是保持样本的等渗环境。
二、组织匀浆液的制备
①、手工匀浆:取组织块(0.2g~0.5g)在冰冷的匀浆介质中漂洗,滤纸拭干,准确称重,放
入匀浆管中,按重量(g):体积(ml)=1:4 的比例加入 4 倍体积的匀浆介质于匀浆管中,冰水
浴条件下,用眼科小剪尽快剪碎组织块,将玻璃匀浆管置于冰水浴条件,手动匀浆,30 秒/
次,间隔 30秒,重复 6~8 次,制成20%的匀浆液。
②、机器匀浆:取组织块(0.2g~0.5g)在冰冷的匀浆介质中漂洗,滤纸拭干,准确称重,放
入匀浆管中,按重量(g):体积(ml)=1:4 的比例加入 4 倍体积的匀浆介质于匀浆管中,冰水
浴条件下,用眼科小剪尽快剪碎组织块,机械式匀浆机(组织捣碎机或内切式匀浆机) ,
10000~15000 转/分,冰水浴条件下,15 秒/次,间隙 30 秒,连续 3~5 次,制成 20%的匀
浆液。
③、液氮研磨:取组织块(0.2g~0.5g)在冰冷的匀浆介质中漂洗,滤纸拭干,准确称重,放
入研钵中,用眼科小剪尽快剪碎组织块,加入液氮研磨至粉末状(研磨要迅速),加入匀浆
介质,充分抽提,制备成 20%的匀浆液。
镜检观察:取少量组织匀浆作涂片,显微镜下观察细胞是否破碎,若没有则可延长匀浆时间。
匀浆上清液的制备:将制备好的 20%匀浆液用普通离心机或低温低速离心机 3500 转/分左右,离
心 10~15 分钟,取上清液进行测定.
三、样本保存:
植物组织样本暂时不测定,可立即低温冻存,温度越低越好,中间如不反复冻融,-20℃以下
可保存三个月,-70℃以下可保存六个月。
制备好的匀浆液建议不要冻存,当天进行测定,如放置时间过长相关酶活会有所下降,部
分指标 4℃可存放 3~5 天(如 SOD 要存放 2~3 天,MDA 可存放 3~5,总蛋白测定可存 5~7 天等)
如指标太多可将匀浆上清液分装保存,每次测定时每个样本取出一管用于测定,切勿反复冻
融。
[注]:磷酸盐缓冲液作为匀浆介质,不可用于无机磷、ATP酶、ATP 含量、羟自由基等相关检测项目;
生理盐水作为匀浆介质,不可用于离子类相关检测项目,如检测离子类相关指标可直接用双蒸水作为匀浆介质。
植物ELISA试剂盒注意事项:
试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
底物请避光保存。
严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
本试剂不同批号组分不得混用。
如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
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