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- 2025年12月20日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
RT
- 保质期：
1-2年
- 英文名：
2×YT Medium Broth
- 库存：
大量
- 供应商：
齐一生物
- 规格：
BR
齐一生物科技（上海）有限公司经营试剂种类众多：覆盖分析化学品，无机化学品，有机化学品，生物化学品，材料化学品。具体详细向客服咨询QQ741653262，电话021-60348496！
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文献和实验一、材料与试剂 1. SOBor2xYT2. MES3. 足够80个管子的TFB（50 mL）/400转化DMSO4. 5 M NaCl 二、仪器 1. 离心机 三、步骤 1. 室温下在5 ml SOB或2×YT中接种菌并且培养过夜。2. 加过夜培养的菌到500 ml 的SOB或2×YT，其装在4L瓶中以最大限度的透气。加入36 ml 5 M 的NaCl，在30℃下培养。3. 大约3 h，OD600达到0.5。4. 离心细胞。取沉淀，吸取
1从微量培养基平皿中挑取单个菌落，接种于5ml 2×YT培养基(17g蛋白胨，10g Bactoyeast,5g NaCl，加水至1 000ml)中，37℃振荡培养过夜。 2取上述过夜菌1∶100稀释接种入500ml新鲜的2×YT培养液中，37℃振荡培养至OD=05~07，约25~3h。 3将上述带有菌液的三角瓶置冰浴15~30min
。对低拷贝数质粒，提取时可加大菌体用量并加倍使用溶液P1、P2 和 P3，可以有助于增加质粒提取量和提高质粒质量。 13. 溶液使用不当： 溶液 P2、P3 在温度较低时可能出现浑浊，应置于 37℃ 保温片刻直至溶解为清亮的溶液，才能使用。 14. 吸附柱过载： 不同产品中吸附柱吸附能力不同，如果需要提取的质粒量很大，请分多次提取。若用富集培养基，例如 TB 或 2×YT，菌液体积必须减少；若质粒是非常高的拷贝数或宿主菌具有很高的生长率，则需减少 LB 培养液体积。 15. 质粒未全部溶解
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