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RT
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1-2年
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Tissue Culture Dishes
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大量
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齐一生物
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文献和实验3复孔,设正常对照3复孔。以10-14天细胞全部死亡的浓度为筛选浓度,结果为200mg/L。2、在转染实验前天接种细胞,各种细胞的平板密度依据各种细胞的生长率和细胞形状而定。进行转染当天细胞应达到60%-80%覆盖。一般要求,6孔培养皿(35mm),每孔1-2ml培养基3×105细胞。依据不同大小培养板调整每平方厘米的细胞数量。典型贴壁细胞平板密度培养板大小 生长面积(cm2)大约细胞数 培养基容积(ml)组织培养皿(φ60mm)28 6.6×105 5-66孔培养板(φ35mm)9.5 3×105
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分钟。6. 1×PBS洗3次,每次10分钟。7. 5%BSA室温封闭30分钟。8. 加一抗(用1%BSA稀释)放在湿盒里,4度过夜。9. 1×PBS洗3次,每次10分钟。10. 加二抗(用1%BSA稀释)30分钟,闭光。11. 1×PBS洗3次,每次10分钟。12. 95%甘油封片。注:4%甲醛,0.2%Triton,5%BSA均用1×PBS稀释。 二、细胞爬片的免疫荧光步骤基本一致: 1. 取出细胞爬片放到35mm或60mm用过的细胞培养皿里,PBS洗三遍。注意
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