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联硕生物
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主营品牌:Sigma、Amresco、santa、hyclone、PeproTech、ABcam、life、Axygen、Corning、AMEKO、Merck、promega、GE、nunc等
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细胞培养:血清,专业培养基,常用传统培养基
耗材:进口、国产细胞培养耗材、普通实验耗材
生化试剂:原装进口生化试剂、进口分装生化试剂、国产生化试剂
抗体:进口原装抗体、进口分装抗体、单克隆抗体、多克隆抗体、一抗、二抗等
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文献和实验异丙基-1-硫代β-D吡喃(型)半乳糖 isop-ropyl-1-thio-β-D-galactopyranoside
异丙基 -1-硫代β -D吡喃(型)半乳糖 isop-ropyl-1-thio-β -D-galactopyranoside 为 isopropyl-1-thio-β -D-galactopyranoside的缩写。是诱导大肠杆菌乳糖操纵子酶合成的强力诱导物。在培养基中加入该物 10-4 克分子时,即可通过存在于大肠杆菌细胞膜中的微量半乳糖苷渗透酶而被参入至细菌体内。通常诱导物质即根据这种通过操纵子的作用制造的β -半乳糖糖苷酶而被利用于代谢的。但 IPTG等不能
)下存在下被IPTG(异丙基硫代-β-D-半乳糖苷)诱导形成蓝色菌落。当外源片段插入到pBS质粒的多克隆位点上后会导致读码框架改变, 表达蛋白失活, 产生的氨基酸片段失去α-互补能力, 因此在同样条件下含重组质粒的转化子在生色诱导培养基上只能形成白色菌落。在麦康凯培养基上,α-互补产生的Lac+细菌由于含β-半乳糖苷酶,能分解麦康凯培养基中的乳糖,产生乳酸,使pH下降,因而产生红色菌落,而当外源片段插入后,失去α-互补能力,因而不产生β-半乳糖苷酶,无法分解培养基中的乳糖,菌落呈白色。由此可将重组
和DH5α编码的β-半乳糖苷酶的片段都没有酶活性。但在pUC18 和DH5α融为一体时可形成具有酶活性的蛋白质。这种lacZ 基因上缺失近操纵基因区段的突变体与带有完整的近操纵基因区段的β-半乳糖苷酸阴性突变体之间实现互补的现象叫α-互补。由α-互补产生的Lac 细菌较易识别,它在生色底物X-gal(5-溴-4 氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)存在下被IPTG(异丙基硫代-β-D-半乳糖苷)诱导形成蓝色菌落。当外源片段TGFβⅠ插入到pUC18 质粒的多克隆位点上后会导致读码框架改变,表达
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