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- 美国Cygnus
- 见说明书
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- KL023932
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
1000
- 供应商：
康朗生物
- 检测范围：
见说明书
- 检测方法：
酶联免疫
- 应用：
科研
- 标记物：
见说明书
- 样本：
血清/组织/尿液
牛次黄嘌呤磷酸核糖基转移酶1(HPRT1)ELISA试剂盒在检测中对照是为了说明检测结果的有效性，空白是为了验证各反应元素，如一抗与二抗，抗原与二抗是否存在非特异性结合，如果OD很低的话（OD490一般小于0.1），可以证实反应系统的非特异性低，为抗原与抗体、二抗的最佳结合条件。阳性对照，主要是验证反应系统在当前反应条件下是否发生了特异性反应，避免发生假阴性。
牛次黄嘌呤磷酸核糖基转移酶1(HPRT1)ELISA试剂盒空白对照有几种
1. 空气空白\水空白: 一般是用于仪器调零的,所有孔数值减掉该孔数值
2.底物空白: 一般是用于防止底物弱显色所造成的读数偏高,同样所有孔数值减掉该孔数值
3. 酶空白: 一般在2步法实验中使用,主要是看酶是否和板有非特异性结合的,一般不做这个
用竞争抗原 +待测抗原+单克隆抗体+酶标二抗，做实验 ，现在如何确定竞争抗原的浓度和单克隆抗体的工作浓度呢？还有空白对照的问题
牛次黄嘌呤磷酸核糖基转移酶1(HPRT1)ELISA试剂盒的竞争ELISA步骤是第一步包被竞争抗原 第二步封闭 第三布加待测抗原 第4步单克隆抗体第5步加酶标二抗 然后显色
关于空白对照的孔 是不是 我第一步包被竞争抗原 第二步封闭 第三步我的稀释液 然后 显色， 第4步单克隆抗体第5步加酶标二抗 就不加了？
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文献和实验特异性的引物PCR扩增。基因经过30-35个循环的一轮PCR扩增。50μl PCR扩增产物中的15μl在1.2％E-Gel®琼脂糖凝胶电泳检测，在紫外光下观察。 泳道1：HPRT（次黄嘌呤磷酸核糖转移酶），1.3kb，30拷贝/细胞 泳道2：SMAP（胸腺激素受体共激活蛋白），3.1kb 泳道3：Cleavage and polyadenylation specificity factor，4.5kb 泳道4：TFRC（转铁蛋白受体），5.0kb 泳道5：IGFⅡR（类胰岛素生长因子Ⅱ受体
体外哺乳类细胞基因突变（HGPRT）试验原理及注意事项 In vitro Mammalian Cell Gene Mutation Test 【试验原理】 体外哺乳动物细胞基因突变试验是利用培养的哺乳动物细胞作指示生物的体外遗传毒理学试验，可用于检测有化学物质诱导的基因突变，适用的细胞系包括小鼠淋巴瘤细胞（L5178Y），中国仓鼠肺细胞（V79），中国仓鼠卵巢细胞（CHO），人类淋巴母细胞（TK6）等。这些细胞系，常用的遗传学终点是检测胸苷激酶（TK）图标，次黄嘌呤鸟嘌呤转磷酸核糖
核苷酸，进而合成DNA，叶酸作为重要的辅酶参与这一合成过程。另一辅助途径是在次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情况下，经次黄嘌吟磷酸核糖转化酶（HGPRT）和胸腺嘧啶核苷激酶（TK）的催化作用合成DNA。细胞融合的选择培养基中有3种关键成分：次黄嘌呤（hypoxanthine，H）、甲氨蝶呤（aminopterin，A）和胸腺嘧啶核苷（thymidine，T），所以取三者的字头称为HAT培养基。甲氨蝶呤是叶酸的拮抗剂，可阻断瘤细胞利用正常途径合成DNA，而融合所用的瘤细胞是经毒性培养基选出的HGPRT-细胞
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