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上海中乔新舟生物科技有限公司
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文献和实验一、原理: 利用荧光染料(bisbenzimide,Hoechst 33258)检测支原体污染。这种染料会结合到DNA的A-T富集区域,因为支原体的DNA中A-T含量高(55%~80%),所以可将其染色而被检测到。被支原体污染的细胞经染色后在细胞周围可看到许多大小均一的荧光小点,即为支原体的DNA染色斑,说明有支原体污染。 二、试剂盒组分 :
光小点,即为支原体的DNA染色斑,说明有支原体污染。 二、试剂盒组分: 1、Hoechst33258工作液50ml 2、固定液50ml 3、封固液10ml 4、说明书1份 三、未提供的设备及耗材: 1、荧光显微镜 2、6孔细胞培养板 3、22×22mm盖玻片 4、载玻片 四、操作步骤: (一)、贴壁细胞: 1、被检细胞接种在无菌的6孔细胞培养板中,接种
细胞后,特别是重要的细胞株,有必要清除支原体,常用方法有抗生素处理、抗血清处理、抗生素加抗血清和补体联合处理。支原体最突出的结构特征是没有细胞壁,一般来讲,对作用于细胞壁生物合成的抗生素,如 -内酰胺类、万古霉素等完全不敏感;对多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺药物普遍耐药。对支原体最有抑制活性及常用于支原体感染治疗的抗生素是四环素类、大环内酯类及一些氟喹诺酮;其他类抗生素如氨基糖苷类、氯霉素对支原体有较小抑制作用,所以常不用来作为支原体感染的化学治疗剂。InvivoGen公司研究开发的新一代












