绿色荧光蛋白标记试剂盒

一. 试剂盒说明

绿色荧光蛋白1962年在一种学名Aequoreavictoria的水母中发现。其基因所产生的蛋白质，在蓝色波长范围的光线激发下，会发出绿色萤光。这个发光的过程中还需要冷光蛋白质Aequorin的帮助，且这个冷光蛋白质与钙离子(Ca2+)可产生交互作用。本产品将绿色荧光蛋白的基因插入慢病毒介导的载体中，通过flap-Ub启动子过表达从而作为报告基因，在细胞中表达。常用于细胞标记后移植追踪，从而评估移植后细胞的归巢以及治疗效果等。

二.试剂盒组份

三. 注意事项

绿色荧光标记液避免反复冻融，操作时要戴手套和口罩。该产品仅限于非临床性科研使用。

四. 操作步骤

细胞传代培养到6孔板或者6cm盘中12-16小时后，将绿色荧光蛋白标记液0.3ml（6孔板一个孔中）或者0.5ml（6cm盘）分别与新鲜细胞培养液混匀，比例为0.3ml绿色荧光蛋白标记液中加入0.7ml新鲜培养液和1.0μl polybrene（终浓度8ng/ml），0.5ml绿色荧光蛋白标记液中加入1.5ml新鲜培养液和2μl polybrean（终浓度8ng/ml）。预混好的绿色荧光蛋白标记液加入到目的细胞培养皿中，此时细胞密度不宜超过60%。2个小时之内每间隔15-30min轻轻晃动被标记的细胞培养皿，可以达到更好的标记效果，2小时之后培养皿中补充等体积的新鲜培养液，过夜培养后更换成新鲜培养液。48小时之后，在荧光显微镜下观察标记绿色荧光效率。