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文献和实验性激活/抑制：通过人为突变Cas9的RuvC1、HNH两个剪切位点，Cas9蛋白的切割能力损失变成dCas9蛋白，dCas9和sgRNA复合物可以在DNA的特定位置结合在DNA上，在此基础上，研究人员在复合物的后方连接一些转录调控元件，如转录激活的VP64、VP16等，转录抑制的KRAB等，同时将复合物锚定在基因转录起始区域的上游，即可实现对特定基因的转录激活或转录抑制。dCas9技术原理3.外源过表达和内源激活的区别和选择4.基因干扰和基因敲除的的区别和选择
。它适合发现耐药基因、分化诱导因子、以及能 rescue 缺陷表型的基因，是敲除筛选的镜像补充。 --- 一、SAM 系统是怎么把基因"打开"的 CRISPRa 的基础是失活的 Cas9（dCas9）——它保留 gRNA 引导的 DNA 结合能力，但失去切割活性。在 dCas9 上融合转录激活域，就能把激活机器招募到特定基因的启动子上。 SAM 系统在此基础上做了增强，包含三个组件： dCas9-VP64：dCas9 融合 4 拷贝 VP64 激活域； MS2-P65-HSF1：一个额外的激活复合
3.73 3.61 3.51 3.44 3.37 3.28 3.18 3.07 2.96 2.85 2.72 12 13 4.96 4.35 4.00 3.77 3.60 3.48 3.39 3.31 3.25 3.15 3.05 2.95 2.84 2.72 2.59 13 14 4.86 4.24 3.89 3.66 3.50 3.38 3.28 3.21 3.15 3.05 2.95 2.84 2.73 2.61 2.49 14 15 4.76 4.15 3.80
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