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- 供应商:
上海笃玛生物科技有限公司
- 规格:
50T.100T
名称:Caspase 9 活性检测试剂盒(比色法)
产品货号:DM-1253
规格:50T.100T
储存条件:—20℃,避光,12个月
用途:分光光度比色法测定pNA在400~410nm处吸光值,从而间接获得caspase 4的活性。
注意事项:检测原理是利用Caspase 9催化特异性底物acetyl-Leu-Glu-His-Asp p-nitroanilide (Ac-LEHD-pNA)产生黄色的游离硝基苯胺pNA(p-nitroaniline),通过分光光度比色法测定pNA在400~410nm处吸光值
Caspase 9 活性检测试剂盒(比色法)染色方法:
(1)将待检菌接种在新制备的肉汤琼脂斜面上,置37°培养16—20小时,备用。
(2)在载玻片的中部相隔一厘米处,用接种环各沾一滴蒸馏水,然后用接种环挑取湿润处的菌苔少许于一端的水滴中,倾斜玻片使培养物流至另一水滴中,两水滴自然相通,菌体从上位自然扩散到下位水滴中,待干燥后染色。
(3)在干燥涂片上加甲液3—5分钟,用蒸馏水冲洗。将残水沥干或用乙液冲去残水后,加适量乙液保持30—60秒钟。染色时在酒精灯上稍加热,使染液出现蒸汽即可,用蒸馏水冲洗。
(4)镜检:菌体及鞭毛皆染成茶色。
Caspase 9 活性检测试剂盒(比色法)注意事项:
(1)染液最好随用随配,存放至次日效果则差。
(2)一定要充分洗净甲液后再加乙液,否则背景较脏。
(3)防止水及培养物沾有氯化物。
(4)切忌用接种环涂抹培养物。
(5)载玻片一定要洗净。先用洗衣粉煮沸,再水洗,干后放在洗液中,浸泡 24 小时,取出水洗除去残酸,沥干,存放于95% 乙醇中备用。
(6)加热时最好置金属板上,使载玻片受热均匀。
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文献和实验Caspase家族在介导细胞凋亡的过程中起着非常重要的作用,其中caspase-3为关键的执行分子,它在凋亡信号传导的许多途径中发挥功能。Caspase-3正常以酶原(32KD)的形式存在于胞浆中,在凋亡的早期阶段,它被激活,活化的Caspase-3由两个大亚基(17KD)和两个小亚基(12KD)组成,裂解相应的胞浆胞核底物,最终导致细胞凋亡。但在细胞凋亡的晚期和死亡细胞,caspase-3的活性明显下降。1、Western blot 分析Procaspase-3的活化,以及活化
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的技术支持,人家说六孔板细胞量不够,不知道您六孔板细胞量够吗?还有您后来做出来的结果咋样?有啥改进的地方没?好愁呀,希望得到您的帮助。急着毕业呀! bin1986 我用的是悬浮细胞,接板密度大于10e6个,用的量完全够。如果这样子的话可能是你的化合物并没有激活casp-3吧 darcy913 你好,你以前应该用过caspase-3比色法检测试剂盒吧,虽然是很久以前的事了,用的是哪家公司的?效果怎么样?我用的是碧云天的,完全没
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