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人柯萨奇病毒抗体igm(cox Ⅲ-igm)ELISA试剂盒

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  • DM-1001330
  • 2025年07月09日
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    • 供应商

      上海笃玛生物科技有限公司

    • 检测范围

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    • 检测方法

      ELISA

    • 应用

      电询

    • 标记物

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    • 样本

      体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆等

    • 规格

      96T/48T

    上海笃玛生物科技有限公司提供的ELISA试剂盒经济,实惠,可靠,完善,稳定的实验体系,优秀的科研队伍,准确可靠的实验结果,是您可靠的合作伙伴,凡购买我司的试剂盒产品都可提供全程免费技术指导。
    产品名称:人柯萨奇病毒抗体igm(cox Ⅲ-igm)ELISA试剂盒
    英文名称:Human Coxsackie virus (Cox Ⅲ) antibody (IgM) ELISA Kit
    种属:人、大鼠、小鼠、豚鼠、兔子、猪犬、牛羊、鸡鸭、植物ELISA试剂盒等
    保存及有效期:2-8℃,避光保存,6个月。
    运输方式:快递,全国包邮
    适用范围:仅供科研使用
    检测目的:用于测定血清,血浆及相关液体等样本,例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本
    人柯萨奇病毒抗体igm(cox Ⅲ-igm)ELISA试剂盒 的特点与优势:
    1)灵敏度高,检测时间短,只需4小时
    2)成本低,操作简单
    3)样本多样,血浆、尿液、细胞上清液等
    4)检测适用于多种不同动物物种
    5)标准范围广,允许使用高浓度样本

    人柯萨奇病毒抗体igm(cox Ⅲ-igm)ELISA试剂盒 试剂盒的操作注意事项:
    1.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
    2.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
    3.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
    4.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
    5.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
    6.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
    7.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
    8.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
    9.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。

    上海笃玛生物科技有限公司人柯萨奇病毒抗体igm(cox Ⅲ-igm)ELISA试剂盒 高品质ELISA试剂盒打折热卖中,量大更优惠,更多相关产品如下:
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    图标文献和实验
    该产品被引用文献

    标本的采集及保存

    1.血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过一晚后于1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。 

    2.血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。 

    3.细胞培养物上清或其它生物标本:1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。 (注:标本溶血会影响**检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。) 
     

    标本的稀释原则:首先通过文献检索的方式了解待测样本的大致含量,确定适当的稀释倍数。只有稀释至标准曲线的范围内,检测的结果才是准确的。稀释的过程中,应做好详细的记录。计算浓度时,稀释了“N”倍,标本的浓度应再乘以“N”。 

       标准品的稀释原则:2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为300 pg/ml,做系列倍比稀释后,分别稀释300 pg/ml,150 pg/ml,75 pg/ml,37.5 pg/ml,18.5 pg/ml,9 pg/ml,4.5 pg/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0 pg/ml,临用前15分钟内配制。 如配制150 pg/ml标准品:取0.5ml(不要少于0.5ml)300 pg/ml的上述标准品加入含0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。 

       生物素标记抗体的稀释原则:临用前以生物素标记抗体稀释液稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100μl),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素标记抗体加990μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。 

       辣根过氧化物酶标记亲和素的稀释原则:临用前以辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100μl),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根过氧化物酶标记亲和素加990μl辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。 
     

    操作步骤

       实验开始前,请提前配置好所有试剂,试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时,用样品稀释液进行稀释,以使样品符合试剂盒的检测范围。 

    1.加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。 为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。 

    2.弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液 100μl(取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制),37℃,60分钟。 

    3.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。

    4.每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液(同生物素标记抗体工作液) 100μl,37℃,60分钟。

    5.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。

    6.依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。

    7.依序每孔加终止溶液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。

    8.用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。 在加终止液后15分钟以内进行检测。

     

    注意事项

    1.用户在初次使用试剂盒时,应将各种试剂管离心数分钟,以便试剂集中到管底。

    2.每次实验留一孔作为空白调零孔,该孔不加任何试剂,只是加底物溶液及2N 。测量时先用此孔调OD值至零。 

    3.为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜。 

    4.未使用完的酶标板或者试剂,请于2-8℃保存。标准品、生物素标记抗体工作液、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的标准品、生物素标记抗体工作液或、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液。 

    5.建议检测样品时均设双孔测定,以保证检测结果的准确性。

     

    洗板方法

    手工洗板方法:吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将推荐的洗涤缓冲液至少0.3ml注入孔内,浸泡1-2分钟。根据需要,重复此过程数次。 

    自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。 

    计算

       以标准物的浓度为横坐标(对数坐标),OD值为纵坐标(普通坐标),在半对数坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。 

    注意事项

    1.当混合蛋白溶液时应尽量轻缓,避免起泡。

    2.洗涤过程非常重要,不充分的洗涤易造成假阳性。

    3.一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

    4.请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。

    5.如标本中待测物质含量过高,请先稀释后再测定,计算时请乘以稀释倍数。

    6.在配制标准品、检测溶液工作液时,请以相应的稀释液配制,不能混淆。

    7.底物请避光保存。 

    8.不要用其它生产厂家的试剂替换试剂盒中的试剂。 

    注意事项:收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本,储存在4 ℃备用,如有特殊原因需要周期收集标本, 将标本及时分装后放在-20 ℃或-70 ℃条件下保存。避免反复冻融。标本2 -8 ℃可保存48 小时,-20 ℃可保存1 个月。-70度可保存6 个月。部分激素类标本需添加抑肽酶。

    计算:以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。 

     

    试剂盒性能

    1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.92以上。

    2.批内与批见应分别小于9%和15% 

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