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KALANG公司坚持与国际接轨,注重和国际先进企业的合作与交流,目前已经和Sigma、Axygen、Merck、Roche、Amresco、Millipore、Whatman、Corning、Fluka、Abcam,Serva、Pharmacia、eBioscience,Applichem、Acros以及Dragon等著名企业结成紧密的合作伙伴关系,并提供产品代理、市场咨询等多项服务,
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文献和实验保温的0.5%的低熔点琼脂糖铺片,加盖玻片,4℃冷凝。3、细胞裂解与电泳:(1)将制备好的胶板去掉盖玻片后,浸于4℃预冷的细胞裂解液中,4℃裂解1小时。(2)取出胶板,放入电泳槽中,浸泡在电泳液中解旋20分钟。(3)4℃电泳20分钟(25V,300mA)。4、中和与染色:(1)电泳结束,将胶板浸泡于中和液中,每次15分钟,共中和两次,注意更换中和液。(2)取出胶板,置于染色架上,滴加5μg/ml的PI,暗处染色20分钟。(3)蒸馏水脱色15分钟。5、镜检和分析:(1)在荧光显微镜下观察,绿光激发吸收滤片590nm
抗原修复主要用于福尔马林或多聚甲醛固定的石蜡包埋组织切片。1、抗原热修复(1)高压热修复在沸水中加入EDTA(pH8.0)或0.01M枸橼酸钠缓冲溶液(pH6.0)。盖上不锈钢高压锅的盖子,但不进行锁定。将玻片置于金属染色架上,缓慢加压,使玻片在缓冲液中浸泡5分钟,然后将盖子锁定,小阀门将会升起来。10分钟后,去除热源,置入凉水中,当小阀门沉下去后打开盖子。本方法适用于较难检测或核抗原的抗原修复。(2)煮沸热修复电炉或者水浴锅加热0.01M枸橼酸钠缓冲溶液(pH6.0)至95℃左右,放入
分钟,共中和两次,注意更换中和液。 (2) 取出胶板,置于染色架上,滴加5μg/ml的PI,暗处染色20分钟。 (3) 蒸馏水脱色15分钟。 5. 镜检和分析: (1) 在荧光显微镜下观察,绿光激发吸收滤片590nm。必要时照相记录。 (2) 记数观察的细胞,记录彗星细胞出现的频率,用目镜测微尺测头长与全长,计算核DNA迁移距离。 * * * * * 使用两层凝胶法,经裂解、DNA解旋、电泳和中和得到湿琼脂糖凝胶片。将湿琼脂糖凝胶片置于冰冷无水
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