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文献和实验,调pH8.3后,用重蒸水定容至1000ml,置试剂瓶中,4℃贮存,临用前稀释10倍。 (3)0.1%溴酚蓝指示剂 (4)染色液 染色液种类较多,染色方法也不完全相同。本实验采用0.05%考马斯亮蓝R250染色液中,含20%磺基水杨酸,其优点是染色、固定同时进行,背景易脱色。0.5%考马斯亮蓝R250的20%磺基水杨酸染色液:考马斯亮蓝0.05g,磺基水杨酸20g,加蒸馏水至100ml,过滤后置试剂瓶内保存。 (5)脱色液 7%乙酸溶液 (6)保存
%(v/v)甘油,20 mL 100 g/L SDS 溶液,10 mL 10 g/L 溴酚蓝溶液,5 mL 2 M Tris-HCl (实测pH8.9±0.1,25℃),5 mL巯基乙醇,9 mL双蒸水。混合母液倒入无色玻璃试剂瓶中,4℃冰箱至少可保存12个月。可分装成10 mL使用,不会使母液受到蛋白污染。(6)10×电泳缓冲液,1000 mL: 称取10 g SDS,30 g Tris base,144g 甘氨酸(事先要明确甘氨酸溶液的颜色,选用溶解后澄清无色的产品)于1000 mL的烧杯
液(pH8.6,0.07mol/L,离子强度0.06):称取1.66g巴比妥(AR)和12.76g巴比妥钠(AR),置于三角烧瓶中,加蒸馏水约600ml,稍加热溶解,冷却后用蒸馏水定容至1000ml。置4℃保存,备用。2、血清蛋白染色(1)染色液(0.5%氨基黑10B):称取0.5g氨基黑10B,加蒸馏水40ml,甲醇(AR)50ml,冰乙酸(AR)10ml混匀溶解后置具塞试剂瓶中贮存。(2)漂洗液:取95%乙醇(AR)45ml,冰乙酸(AR)5ml和蒸馏水50 ml混匀置具塞试剂瓶贮存。(3)透明
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