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文献和实验等。 葡聚糖凝胶介质是由多聚葡聚糖与环氧绿丙烷交连而成。最常用的葡聚糖凝胶层析介质是Sephadex G系列,不同型号的凝胶用G表示,G代表交联度,从G10到G100。“G”后面的数字表示每10g干胶的吸水量,可根据待分离混和物分子量大小选用不同“G”值的凝胶。 2. 分离过程: 样品随洗脱液的流动下移 3. 影响凝胶柱层析的主要因素 (1)层析柱的选择与装填 层析柱的大小应根据分离样品量的多少及对分辨率的要求而定。凝胶柱填装后用肉眼观察应均匀
相关专题 分子量测定的实验方法与强兵利器 实验原理 葡聚糖凝胶(Sephadex)过滤法测定蛋白质分子 量的原理,主要是依据这种凝胶具有分子筛作用,一定型号的凝胶具有大体上一定大小的孔径。在一定的凝胶柱内,凝胶孔隙所占的体积称为内水容积Vi,凝胶颗粒间的自由空间所占的体积称为外水容积V0。当样品流经凝胶柱时,大于孔隙的大分子完全不滲入到凝胶内部,只需V0体积的洗脱液便可将其由一端洗脱到另一端;相反,如果样品体积小于孔隙
)。 2.3 试剂 1. 产品和液体贮存液 ( 1 ) 葡聚糖 T-500 和聚乙二醇(PEG ) 3350 分别购自 Amersham 和 Union Carbide。根据分子质量分别配制 20% 和 40% 的葡聚糖 T-500 和 PEG 3350 的贮存液(见注释 1)。 ( 2 ) 0.2 mol/L 的二水 EDTA 钠盐(的 EDTA - Na2) 贮存液的配置:500 ml 的水 ( 终体积)溶解 37.2 g 的 EDTA -Na2。在粉末中用 Trizma 碱(Sigma
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