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【简单介绍】
FlexWell™芯片孵育池为在载玻片(特别是ONCYTE®膜被覆载玻片)上进行蛋白质芯片研究中的结合反应提供最佳帮助。孵育池硅胶制造,一面有特殊的粘合剂(带可去除的衬纸),去除衬纸后可在玻片上形成紧密的密封。芯片围栏(gasket)上可以用Seal Strips封片膜封口防止蒸发。【详细说明】
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文献和实验基因芯片技术具有快速多样、微型化和自动化等特点在生物医学领域广泛的应用。但由于其基本原理是基于核酸杂交技术,有着内在的缺陷,实验的敏感性和重复性都存在一定问题。核酸杂交较适合于检测基因的表达,不易检测基因组DNA的基因的重排,突变和缺失。而大多数肿瘤性疾病和一些遗传变异和表型的改变与后者有关。为了解决上述问题,我们将芯片技术与荧光PCR技术相结合,设立设计一种含有大量微反应池的PCR基因芯片,以期能快速、准确的对基因的重排,突变和缺失等基因变异进行检测。常规PCR反应产物的检测是电泳后观察获得
,时间就要长一些,反之亦然。另外,保持反应池湿润是重要的一环,否则,前功尽弃。后面的步骤也是如此。6、一抗(抗β1-integrin)反应:一抗的稀释度、孵育时间和温度与染色强度与背景有直接关系。一般说来,阳性染色强度不够时,可提高一抗浓度和延长孵育时间;背景过高时则相反。一抗的浓度:这需要自行探索,虽然试剂公司给出了参考浓度,但仍然要探索出恰当的浓度,任何取巧的念头都是在自讨苦吃。孵育时间与温度:抗原抗体充分反应是得到可靠结果的关键。因此,控制温度与时间也是一个严肃的问题。由于室温控制较为困难
蛋白质样品中的一个特定亚群将通过简单的化学作用或者蛋白质相互作用被芯片捕获。 步骤三:未结合成分的洗脱 孵育后,未结合的蛋白和其他成分从芯片表面洗脱掉。只有那些特异性结合的蛋白质才保留下来用于进一步的分析。这种选择性的洗脱进一步选取基于芯片特色的蛋白质集合。 步骤四:在SELDI蛋白质阅读机上进行分析 在洗脱步骤之后,点加上含有能量吸收分子(EAM)的有机溶液。EAMs对样品的离子化起关键作用。在蛋白质溶解到含有EAM的溶液之后,溶液挥发掉,在芯片表面形成蛋白质和EAMs的共结晶
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