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- 详细信息
- 文献和实验
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2-8℃
- 英文名:
VSMC
- 库存:
大量
- 供应商:
康朗生物
- 规格:
株
抗体纯化/标记/免疫检测
免疫分析检测是一项应用广泛的技术,利用抗原和抗体的特异性反应进行检测的一种手段,广泛用于医学病理学、免疫组织化学、分子生物学、生物制药等领域的分析研究与技术测定。制备高特异性、高效价的抗体是实验免疫学技术的基础,抗体质量的高低将直接影响试验的成败。抗体纯化能降低非特异性本底,抗体标记能通过标记物的增强放大效应提高检测灵敏度,采用ELISA、WB、IP、IHC等不同免疫分析技术检测各种样品中特定的目的蛋白。 我公司拥有国内领先的抗体服务技术、先进的仪器设备和专业的抗体技术人员,可为客户提供:(1)多种抗体纯化服务,如硫酸铵纯化、Protein A/G纯化、抗原亲和纯化等,帮助客户解决各种抗体纯化问题;(2)一流的抗体标记服务,包括生物素标记、荧光素标记、酶标记等;(3)多种免疫检测分析 技术服务:酶联免疫吸附实验(ELISA),免疫印迹(WB),免疫沉淀(IP)和免疫组化(IHC)等。
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文献和实验培养了快一个月的细胞了,今天终于鉴定出是我想要的血管平滑肌细胞。我养的是大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞,采用的是组织贴块法培养。10天后传第一代(图1),16天后第二代(图2),22天后第三代(图3),并做a-actin免疫细胞化学鉴定(图4)。 图1图2图3 图4典型的血管平滑肌细胞生长"hill and valley"现象。
组织化学染色。(α-SM-actin免疫组织化学鉴定)胰酶消化法培养平滑肌细胞1.1 试剂和动物胰酶购自Sigma公司;α-actin抗体购自中山生物技术有限公司;PBS液各成分均为市售分析纯;新生小牛血清购自HyClone;DMEM为Gibco产品。雄性Wistar大鼠(2只,体重175±25 g)购自中国医学科学院实验动物中心。1.2 胰酶消化法原代培养Wistar大鼠处死,迅速取出胸主动脉,浸泡在含无菌PBS的表面皿中,转移到无菌超净台。在表面皿中漂洗主动脉去除残留的血迹,纵向剪开主动脉,把主动脉铺平
消化法原代培养兔胸主动脉平滑肌细胞用DMEM配0.2%的1型胶原酶(用20的血清的DMEM配可能更好,有类似文献),分装于青霉素小并,每并2-3ml。1只免的胸主动脉置于1瓶消化液中消化,消化约10几个小时(消化程度的把握要体会),离心后,接种(若见细胞量大,成功把握大),绝对静置3天(没必要看,看多了无益),8天可传代。犬胸主动脉平滑肌贴块法——方法成熟,比消化法好控制的多。1、取材过程要快,取好放4度储存的D-hanks液带入超净台,不然先天不足;2、块大小密度影响不是很大(尽量小),关键
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