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大量
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康朗生物
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现货
- 保修期:
6-12个月
- 规格:
100 ml
一细胞产品(Cell’s Product)
(一)正常人原代细胞(A:5*105 细胞数/每瓶)
(二)病人肿瘤原代细胞(5*105细胞数/每瓶)
(三)大鼠,小鼠原代细胞(C订制:1*106以上细胞数/每瓶)
(四)细胞系(株)库
1,人源性细胞系(株)2,小鼠源性细胞株,3,大鼠源性细胞系4其他源性细胞系5,杂交瘤细胞
(五),细胞培养体系(培养基,添加剂,血清及相关试剂)
二,细胞为核心生物医药技术服务外包产品(cells CRO)
三、 原代细胞共性
原代细胞现在广泛应用于分子、细胞生物学和生物医学基础研究,如蛋白质组学、基因组学、细胞株(系)研究、DNA、RNA和遗传学研究等,还应用于当今热门的生物医药产业如药物筛选、药物代谢和毒理研究、癌症药物的研究等。原代细胞在生物医药领域有不可替代的作用,市场前景十分广阔。我国原代细胞用于实验才刚刚开始,随着实验要求的提高和全球生物医药研发重心的东移,我国对原代细胞的需求在逐年递增。
除了部分终末分化的细胞,一般的细胞都能传代8-10代及以上,有些细胞甚至更多,但是一般都建议客户采用3-4代以内的细胞。
在原代细胞培养过程中,一般是初次培养过夜后换液,以后每隔2-3天换一次液,以培养液的颜色为标准,一般变黄后就需换液。原代细胞的传代前期一般是3-4天传一次代,后期一般是4-6天传一次代(前期指前三代,后期指三代后)。
四,细胞系(Cell Line) 系由系列传代培养的第一次培养或其中任何阶段培养制备的细胞群(非原始培养细胞)。该细胞群通常是非均质的。
细胞系是指从某初代培养开始通过连续培养所产生的所有细胞。包括从初代培养的细胞和细胞群所发展的一系列的细胞。如果培养的状态清楚,则在前面冠以有限继代性(finite)或连续继代性(continuous)。例如,人二倍体成纤细胞系属于前者,HeLa细胞系属后者。另外连续继代性细胞系也称为树立细胞系
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文献和实验(All steps with agitation, unless done O/N at 4℃)►Rinse membrane once in TBS-T►Block the membrane with TBS-T/ 5% milk (or HIHS) for 30 min room►temp (can be left at 4℃ O/N here)►Rinse membrane briefly 2X with TBS-T and then once for 10 min with TBS
Western blotting using ECL reagent
REAGENTSECL Western blotting kit (Amersham Life Science; cat# RPN2108): contains second antibodies for both mouse and rabbit, substrate and milk blocker (the milk blocker is not normally used when using ruminant samples).Hybond ECL nitrocellulose
Ecl 显色原理:鲁米诺在免疫测定中既可用作标记物,也可用作过氧化物酶的底物。在Ecl底物中,含有H2O2和鲁米诺,在HRP(辣根过氧化物酶)的作用下,发出荧光来。 试验步骤: 1)将两种显色底物1:1等体积混合(一般各1ml/membrane)。 2)将混合物覆盖在膜表面,1-2分钟,摇晃使均匀。 3)用保鲜膜把膜包起来,放入夹板中。 4)在暗室中将X光片,覆盖在膜的上面,夹好夹子,曝光1min。 5)显影、定影。 6)根据结果调整曝光时间和曝光区域,得到
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