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文献和实验（Araujo 等人， 2016 年； Sakaue-Sawano 等人， 2008 年）。 其中一种探针是基于荧光泛素化的细胞周期指示剂 FUCCI (CA)，由 Miyawaki 及其同事开发（Sakaue-Sawano 等人， 2017 年），它监控 Cdt1 和联会蛋白（两种重要的细胞周期蛋白）的降解，产生 G1、S 和 G2 期（红色、绿色和黄色）的清晰三色分离，可在显微镜的 YFP 和 mCherry 通道中观察到（图 2）。 图 2. 使用 FUCCI(CA) 探针测量细胞周期的 G1
端和 C 端结构域（分别记为 N-CaM 和 C-CaM ) 以及 CaM 识别序列（CRS) 组成 [5~7] 。CRS 的位置取决于它的结合取向，它或者放在 CaM 的 N 端、CaM 的 C 端，或者放在 N-CaM 和 C-CaM 之间 [ 见图 4.2 ( A ) 和注 2] 。在 Ca2+ 流入之后，CaM 结合到 CRS 上，引起构象变化，拉近 CFP 和 YFP，以增加 FRET 效率（见图4.2B)。已用 CFP-YFP 作 FRET 伙伴，制造出数种黄色的钙变色子（YC
2【四】荧光能量共振转移，fluorescence resonance energy transfer(FRET)，这个技术与第三条又有所不同。人们将目标蛋白 A 与青色荧光蛋白 CFP 融合表达，将 A 的可能的互作蛋白 B 与黄色荧光蛋白 YFP 融合表达，CFP 的激发光是波长是 414nm 紫外光区域，而荧光波长是 475nm 蓝光区域，恰好 YFP 的激发光是 475nm 附近蓝光区域，而荧光则是 525nm 附近黄色光区域。如果 AB 两蛋白相互作用。空间上相互接近，导致 CFP
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