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产品全称::54113-95-0,15-Hydroxydehydroabieticacid
产品货号:QY-FZ0506
CAS:54113-95-0
中文名称:15-Hydroxydehydroabieticacid
英文名称:
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文献和实验手把手教你利用 CRISPR-Cas9 系统精准敲除靶标基因
一、CRISPR-Cas 系统简介图 1 CRISPR-Cas9 系统介绍CRISPR-Cas9 系统是一种被广泛运用的基因组编辑工具,它来源于细菌的适应性免疫系统。CRISPR-Cas9 系统包括:Cas9 酶和一个向导 RNA。 向导 RNA 作用是引导 cas9 到基因组的特异性位点上切割。如图 1 所示。目前为止,CRISPR-Cas9 系统主要有两方面应用: 基因敲除和基因敲入。基因敲除时, 一旦 DNA 的双链断裂反应(DSB)被 Cas9 切割诱导发生, 细胞会启动 NHEJ
, Yakunin AF, van der Oost J,Koonin EV (2011) Evolution and classifi cationof the CRISPR-Cas systems. Nat Rev Microbiol9(6):467–477. doi: 10.1038/nrmicro2577 15. Bhaya D, Davison M, Barrangou R (2011) CRISPR-Cas systems in bacteria and archaea
, Fast程序,以cDNA为模板进行。C. 目的基因的设置:有几个目的基因和目的基因的名称。D. 样品的设置:包括哪个是实验组,哪个是对照组。以及负对照的设置和生物重复的设置。E. 对照组和内参基因的设置:这个是为后面的定量做准备F. 反应程序的设置:PCR反应程序的设置要根据不同公司的MasterMix。比如BioTeke的95℃ 2分钟就可以激活DNA聚合酶(ABI的需要10 分钟)。循环反应是95℃15秒,60℃15秒的40个循环。溶解曲线程序采用仪器默认设置就可以。或者是仪器说明书上建议的程序
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