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文献和实验zhqmjeremy 各位战友好。有一个问题,未得其解,恳请帮助。 做荧光素酶报告基因的时候,检测的是细胞因子的启动子。换句话说,是细胞因子的启动子融合的报告基因被转染到细胞内,通过刺进因素作用后,检测启动子的表达情况。这个是背景。 问题是,怎么通过使用内参的方法,去除转染效率不同的孔和细胞之间的差别。 因为,个人认为,细胞数对报告基因的表达量影响比较大。 谢谢。 daidaiyidaidai
无脊椎动物,昆虫纲,鞘翅目,萤科。身体约长 1厘米,细长而扁平,黑褐色,前胸背和尾端呈暗黄色或桃红色。头隐于前胸下。口尖能咀嚼。少数雌雄虫均有鞘翅,如江、浙一带常见的黄萤( Luciolaterminalis)和大黄萤( Luciolasubs-triata),多数仅雄虫有鞘翅,雌虫无鞘翅;鞘翅较软。腹部具有 7或 8节,末端下方有发光器。一般由发光层、反光层和透明的表皮层组成;在发光层内约有 15000多个发光细胞,细胞内有荧光素和荧光素酶两种物质,当虫体呼吸时,在荧光素酶
-SV40载体DNA共转染培养在标准6孔板中的CHO细胞 (2.5 ×105 细胞/孔)。培养30小时后,将培养液吸干,每孔中的附着细胞用PBS洗涤一次。制备裂解液时加入500μl Passive Lysis Buffer到每一个培养板中,在室温温和地震荡15分钟。立即测试小组份的每一种裂解物中萤火虫和Renilla荧光素酶活力,然后分装,保存在 22℃(室温)、4℃,或-20℃。保存的样品在指示的时间间隔内重新测试。测试按图5所描述的方法进行,每一个方框代表3个重复的细胞裂解物,作2次重复
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