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康朗生物
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非常品质
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文献和实验问:现在我用的南京建成的试剂盒来测脂肪酶,可是结果可以说是乱七八糟,一点也不稳定,这个问题也咨询过几位师兄,也有类似情况发生。不知道各位战友有没有碰到过这种情况?可有解决办法或者其他的测定方法?能否传授一下小弟?不胜感激! 答:我也用过南京建成的试剂盒,结果和你一样,看来试剂盒测脂肪酶还很不成熟。你可用常规方法(聚乙烯醇橄榄油乳化法),方法简单可靠,到处都能查到此方法。 答:乙烯醇的办法我试过,用国产试剂效果还是不好。建议用sigma的橄榄油,不过价格很贵。 实验方法如下:Lipase
与橄榄油比为2:1 ,还有你的缓冲液的PH值,50度是不是太高了点,有没有用破乳剂呀?答:我们这也是做脂肪酶的,我们做过乳化液要现配。破乳剂就是用10ML30%的氯化钠,你可以试试。还有就是反应的最适PH,你也可以做几个不同的温度、PH看看。
问:向大家请教脂肪酶活力的测定方法、仪器、试剂。多谢指教!答:可以考虑采用 橄 榄 油乳化液法测定脂肪酶的活力,具体步骤如下:取100 ml,三角瓶4个,每瓶加人5 mL磷酸缓冲液(pH= 7.5 , 0.02 5mol/1)和4m l,聚乙烯醇橄榄油乳化液,置于37 C水浴中保温5 min,然后在两个瓶中各加人1 MI.酶液。从加人酶液开始精确计算时间,继续保温10 min,取出后立即加入95%乙醇5 ml,,以停止酶作用,再加酚酞指示剂3滴,用0.0 5m ol/I,的氢氧化钠滴定至溶液呈
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