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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
1000
- 供应商:
康朗生物
- 检测范围:
见说明书
- 检测方法:
酶联免疫
- 应用:
科研
- 标记物:
见说明书
- 样本:
血清/组织/尿液
英文学名:VMA ELISA kit
科研名称:人垂草扁桃酸(VMA)elisa定量试剂盒
实验名称:人垂草扁桃酸(VMA) ELISA试剂盒
规格:48T/96
保存:2-8℃(低温避光)
产品的用途:仅供科研ELISA检测试剂盒。
检测种属:人、大小鼠、兔、羊、猴、猪、豚鼠ELISA检测试剂盒等种属。
ELISA常用的方法:双抗体夹心法、间接法、竞争法以及BAS-ELISA等。
人垂草扁桃酸(VMA)ELISA检测试剂盒(血清):血清是最常用于ELISA检测的一类样本,处理也比较简单。
用无热原、无内毒素的试管或离心管采集血液标本,将试管或离心管室温放置2小时或4℃过夜,使血清析出。(最好将试管或离心管倾斜放置,使液面横截面增大,能使血清更大程度的析出。)4℃ 1000×g离心20分钟,仔细收集上清。建议将血清分装多份,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。
采血过程中应避免溶血,因为红细胞裂解时会释放具有过氧化酶活性的物质,在以HRP为标记的ELISA检测中会有非特异性的显色,而导致检测的不准确性。同时也应避免细菌污染,因为菌体内可能含有内源性的HRP从而导致检测的假阳性。
(血浆):用含抗凝剂的采血管或离心管采集血液标本,标本采集后30min内4℃ 1000×g离心15min,取上清即血浆。将上清分装多份,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。避免使用溶血或高血脂的标本。
常用的抗凝剂为EDTA、肝素钠和枸橼酸钠等,检测时还应仔细阅读试剂盒说明书,检查试剂盒是否对抗凝剂有特殊要求。
(细胞培养上清):取细胞培养上清到离心管,1000×g离心20min,除去细胞碎片及杂质,取上清,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。
人垂草扁桃酸(VMA)ELISA检测试剂盒(细胞裂解液):
1) 吸去培养板内的培养基,用胰酶消化细胞,加适量培养基将细胞从培养板上吹下来。悬浮细胞可省略。
2) 收集细胞悬液,1000×g离心10min,弃去培养基,用预冷的PBS润洗3次。
3) 加入适量的预冷PBS或细胞裂解液(临用前加入蛋白酶抑制剂)重悬细胞。通常6孔板一个孔的细胞量需要150~250μL PBS重悬。
4) 将样品放入-20℃或-80℃,使样品冷冻,再放室温解冻样品,反复冻融几次,使细胞充分裂解。也可将样品进行超声破碎,以达到裂解的目的。
5) 4℃ 10000×g 离心10min,除去细胞碎片,取上清,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。
(组织匀浆液):
1) 将组织样本用PBS (0.01M, PH 7.4) 冲洗,洗去组织表面残留的血液或杂质。
2) 将组织块称重,记录后剪碎,碎块应尽量小,便于匀浆得更充分
3) 将组织按一定的比例加入预冷的PBS(临用前加入蛋白酶抑制剂)匀浆,匀浆时置于冰上或冰浴中。(通常按组织重量:PBS体积=1:9的比例匀浆,例如1g的组织样本对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,检测后计算样品浓度时应乘以相应的稀释倍数)
4) 吸取匀浆液到离心管,4℃ 5000×g 离心5~10min,取上清,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。
人垂草扁桃酸(VMA)ELISA检测试剂盒(尿液、唾液等其他液体生物样本):1000×g离心20min,取上清即可检测。
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文献和实验铬细胞瘤的主要标志物,它比儿茶酚胺和香草扁桃酸更稳定。 ⒉垂草扁桃酸(VMA)香草扁桃酸(3-甲氧-4羟苦杏仁酸,VMA)是肾上腺素和去甲肾上腺素经单胺氧化酶(MAO)和儿茶酚胺-0-甲基转移酶(COMT)的作用下,甲基化和脱氨基而产生的降解产物。VMA主要是从尿中排出。 高效液相电化学检测是常用的方法,正常参考值随年龄增长而增加,成人为5.0-35.0μmol/24h尿。 能合成儿茶酚胺类的肾上腺髓质的嗜铬细胞及交感神经细胞末梢,均源于胚胎期神经嵴,这两种组织含有相同的酶。一旦这类
又是神经递质。 ⒈变肾上腺素:变肾上腺素是儿茶酚胺的甲氧化代谢产物,由于甲基化是在肝脏内微粒体中进行,而儿茶酚胺的形成都是在肾上腺髓质的嗜铬细胞及交感神经末梢处形成,所以,从检测尿中的变肾上腺素浓度可间接地了解儿茶酚胺的分泌。 目前使用高效液相的紫外检测仍是最为有效的方法之一,正常值为0.30-1.50μmol/24h尿。变肾上腺素浓度增高是分泌型嗜铬细胞瘤的主要标志物,它比儿茶酚胺和香草扁桃酸更稳定。 ⒉垂草扁桃酸:香草扁桃酸(3-甲氧-4羟苦杏仁酸,VMA)是肾上腺素和去甲
尿液检验常用的防腐剂: 尿液检验最好留取新鲜标本及时检查,否则尿液生长细菌,使尿液中的化学成分发生变化。在留取24小时或12小时尿液时,尿液标本应置冰箱保存或加入防腐剂(anti-septic),常用的防腐剂有: 1.浓盐酸盐酸使尿液保持酸性,阻止细菌繁殖,同时防止一些化学物质因尿液碱化而分解,通常用量为0.5~1.0ml浓盐酸/100ml尿液,适用于24小时尿儿茶酚胺、秀草扁桃酸(VMA)、17-羟皮质类固醇和17-酮类固醇等定量测定。 2.甲苯甲苯可在尿液表面形成薄膜,防止细菌
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