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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
1000
- 供应商:
康朗生物
- 检测范围:
见说明书
- 检测方法:
酶联免疫
- 应用:
科研
- 标记物:
见说明书
- 样本:
血清/组织/尿液
英文学名:CLEC4E ELISA kit
科研名称:人C型凝集素结构域家族4成员E(CLEC4E)elisa定量试剂盒
实验名称:人C型凝集素结构域家族4成员E(CLEC4E) ELISA试剂盒
规格:48T/96
保存:2-8℃(低温避光)
产品的用途:仅供科研ELISA检测试剂盒。
检测种属:人、大小鼠、兔、羊、猴、猪、豚鼠ELISA检测试剂盒等种属。
ELISA常用的方法:双抗体夹心法、间接法、竞争法以及BAS-ELISA等。
人C型凝集素结构域家族4成员E(CLEC4E)ELISA检测试剂盒(血清):血清是最常用于ELISA检测的一类样本,处理也比较简单。
用无热原、无内毒素的试管或离心管采集血液标本,将试管或离心管室温放置2小时或4℃过夜,使血清析出。(最好将试管或离心管倾斜放置,使液面横截面增大,能使血清更大程度的析出。)4℃ 1000×g离心20分钟,仔细收集上清。建议将血清分装多份,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。
采血过程中应避免溶血,因为红细胞裂解时会释放具有过氧化酶活性的物质,在以HRP为标记的ELISA检测中会有非特异性的显色,而导致检测的不准确性。同时也应避免细菌污染,因为菌体内可能含有内源性的HRP从而导致检测的假阳性。
(血浆):用含抗凝剂的采血管或离心管采集血液标本,标本采集后30min内4℃ 1000×g离心15min,取上清即血浆。将上清分装多份,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。避免使用溶血或高血脂的标本。
常用的抗凝剂为EDTA、肝素钠和枸橼酸钠等,检测时还应仔细阅读试剂盒说明书,检查试剂盒是否对抗凝剂有特殊要求。
(细胞培养上清):取细胞培养上清到离心管,1000×g离心20min,除去细胞碎片及杂质,取上清,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。
人C型凝集素结构域家族4成员E(CLEC4E)ELISA检测试剂盒(细胞裂解液):
1) 吸去培养板内的培养基,用胰酶消化细胞,加适量培养基将细胞从培养板上吹下来。悬浮细胞可省略。
2) 收集细胞悬液,1000×g离心10min,弃去培养基,用预冷的PBS润洗3次。
3) 加入适量的预冷PBS或细胞裂解液(临用前加入蛋白酶抑制剂)重悬细胞。通常6孔板一个孔的细胞量需要150~250μL PBS重悬。
4) 将样品放入-20℃或-80℃,使样品冷冻,再放室温解冻样品,反复冻融几次,使细胞充分裂解。也可将样品进行超声破碎,以达到裂解的目的。
5) 4℃ 10000×g 离心10min,除去细胞碎片,取上清,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。
(组织匀浆液):
1) 将组织样本用PBS (0.01M, PH 7.4) 冲洗,洗去组织表面残留的血液或杂质。
2) 将组织块称重,记录后剪碎,碎块应尽量小,便于匀浆得更充分
3) 将组织按一定的比例加入预冷的PBS(临用前加入蛋白酶抑制剂)匀浆,匀浆时置于冰上或冰浴中。(通常按组织重量:PBS体积=1:9的比例匀浆,例如1g的组织样本对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,检测后计算样品浓度时应乘以相应的稀释倍数)
4) 吸取匀浆液到离心管,4℃ 5000×g 离心5~10min,取上清,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。
人C型凝集素结构域家族4成员E(CLEC4E)ELISA检测试剂盒(尿液、唾液等其他液体生物样本):1000×g离心20min,取上清即可检测。
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文献和实验饥饿的 HeLa 和 NIH 3T3 癌细胞系获得的裂解物中的磷酸化蛋白特异性。图示:从复杂生物样品中富集高纯度磷蛋白。用 theThermo Scientific Pierce 磷酸化蛋白富集试剂盒进行 Weste blot 分析,根据试剂盒说明书制备细胞裂解液,富集磷酸化蛋白。利用识别生长因子信号传导相关关键调控蛋白的磷酸化特异性抗体实现蛋白检测。细胞色素 C (pI 9.6) 和 p15Ink4b (pI 5.5) 作为非磷酸化蛋白非特异性结合的阴性对照。FT = 流穿馏分,W = 合并洗脱馏分,E
) 3、染色质浓缩 4、DNA裂解:核小体DNA ladder 5、磷脂酰丝氨酸由质膜内侧翻转至外侧 6、凋亡小体的释放 第二节 凋亡的分子机制 一、细胞表面死亡受体 细胞死亡受体家族的成员是一类跨膜蛋白,它们均含有一个与配基结合的胞外结构域;一个跨膜域和一个转导胞外信号进入胞内的胞内结构域(死亡结构域)。这此受体(如Fas、TNF受体)同它们的配基结合后被激活并导致细胞凋亡。 二、Bcl-2家族 对B细胞淋巴瘤的研究发现bcl-2是一种抗凋亡基因,进一步研究证明它与ced-9基因
表达。平足蛋白上的血小板凝集因子会和血小板上的C型外源凝集素CLEC-2结合引起血小板凝集,诱发癌细胞进行血行转移6)。为了验证抑制血小板凝集素是否能抑制癌细胞转移,加藤等人进行了抑制人血小板凝集的抗人平足蛋白抗体的建立实验,实验中得到的抗体就是NZ-17)。NZ-1是以人平足蛋白N末端的14个氨基酸残基(EGGVAMPGAEDDVV)对应的合成肽作为抗原建立的,所以NZ-1对人细胞上的平足蛋白有很高的亲和性,而且能够十分有效地抑制人平足蛋白和CLEC-2的结合,有很大可能能够成为抗体
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