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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
1000
- 供应商:
康朗生物
- 检测范围:
见说明书
- 检测方法:
酶联免疫
- 应用:
科研
- 标记物:
见说明书
- 样本:
血清/组织/尿液
人δ样蛋白1同源物(DLK-1)ELISA试剂盒的原理 ELISA 的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。人δ样蛋白1同源物(DLK-1)ELISA试剂盒在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗 。
a.分子量大。合成肽采用化学方法制备,由于工艺的局限,合成数量有限,只能达到数百个氨基酸;而利用基因工程制备的抗原,分子量更大。
b.稳定性好。人δ样蛋白1同源物(DLK-1)ELISA试剂盒包被的抗原的稳定性可使 试剂 盒的效期得到保证,早期以合成肽为包被抗原的 试剂 盒效期只有3-4 个月,采用基因工程抗原后效期大大延长了。
c.基因工程抗原将特异性抗原决定簇基因融合表达,表达产物包含更多的抗原决定簇,可提高 试剂 盒的灵敏度,提高检出率。
d.纯化难度大。基因工程抗原的纯化技术难度较大。
合成多肽抗原是根据蛋白质抗原分子的某一抗原决定簇的氨基酸序列人工合成的多肽片段。合成肽抗原有以下特点: a.分子量太小;b.一般只含有一个抗原决定簇;c.纯度高;d.稳定性差。
人δ样蛋白1同源物(DLK-1)ELISA试剂盒棋盘试验的操作方法:
(1)将抗原按一定的梯度倍比稀释后,按照ELISA从上到下(或者从左到右)的顺序包被。
(2)将抗体按一定的梯度倍比稀释后按照ELISA从左到右或者从上到下加入。
(3)二抗的稀释倍数是一定的,然后显色,读值。
OD值的测定时,波长要根据显色剂的不同而定,一般上大家都使用TMB显色,450nm读值。根据读值得结果可以选定合适的抗原和抗体效价,人δ样蛋白1同源物(DLK-1)ELISA试剂盒这就是棋盘 实验的目的,如果抗原包被量已知而二抗的工作浓度不确定的话就用一抗和二抗作棋盘试验。
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文献和实验人血管生成素样蛋白3(ANGPTL3)ELISA试剂盒 说明书
上海西唐生物科技有限公司 021-55229872, 65333639 www.westang.com 人血管生成素样蛋白3 (ANGPTL3)ELISA 试剂盒 ( 用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内 ) 原理 本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA 法。用抗人 ANGPTL3 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 ANGPTL3与单抗结合,加入生物素化的抗人
产生假阳性反应。一般说来,在 3 天内测定的血清标本可放置于 4℃,超过一周测定的需低温冰存。冻结血清融解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀宜轻缓,避免气泡,可上下颠倒混和,不要在混匀器上强烈振荡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤,澄清后再检测。反复冻融会使抗体效价跌落,所以测抗体的血清标本如需保存作多次检测,宜少量分装冰存。保存血清自采集时就应注意无菌操作,也可加入适当防腐剂。 2. 试剂的准备 按试剂盒说明书的要求准备实验中需用的试剂。 ELISA 中用的蒸馏水或去离子
酶的ELISA试剂盒中使用的洗板液一般为含0.05% Tween20的中性PBS,Tween20为一种非离子去垢剂,既含亲水基团,也含疏水基团,其在洗涤中的作用机理是,借助其疏水基团与经疏水性相互作 用被动吸附于聚苯乙烯固相上蛋白的疏水基团形成疏水键,从而削弱蛋白与固相的吸附,同时在其亲水基团与液相中水分子的结合作用下,促使蛋白质脱离固相而进 入液相,这样就可达到去掉非特异吸附物的目的,但由于抗体或抗原的包被通常也是通过在碱性条件下与固相的疏水性相互作用而被动吸附于固相,因此要注意非离 子去垢剂的使用
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