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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
4ºC无菌避光
- 保质期:
有效期6周
- 英文名:
Human DiI-High Density Lipoprotein, (Human DiI-HDL)
- 库存:
大量
- 供应商:
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 规格:
500μg(20611ES76)/1 mg(20611ES80)
| 规格: | 500μg(20611ES76) | 产品价格: | ¥3255.00 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 1 mg(20611ES80) | 产品价格: | ¥6495.00 |
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 保存 | 价格(元) |
|---|---|---|---|---|
| Human DiI-High Density Lipoprotein, (Human DiI-HDL) 红色荧光标记人源高密度脂蛋白 |
20611ES05 | 2 mg | 4ºC避光 | 11825.00 |
产品描述
脂蛋白在人体中主要起到运输脂质(如胆固醇、脂质、甘油三酯)的作用,按照分子量大小,主要分为以下几种(从高到低):乳糜(CM)、极低密度脂蛋白 (VLDL)、中间密度脂蛋白 (IDL)、低密度脂蛋白 (LDL)、高密度脂蛋白(HDL)等。其中HDL是密度最-高的脂蛋白,不像其他大分子脂蛋白,主要将脂质运输到细胞,HDL是将脂质运出细胞,因此,高密度脂蛋白具有清除血管内多余血脂、清除血垢、清洁血管、维持细胞内胆固醇量的相对衡定的作用,从而限制动脉粥样硬化的发生发展,起到抗动脉粥样硬化作用。
本品Human DiI-High Density Lipoprotein为荧光探针DiI(1,1'-dioctadecyl-3,3,3',3'- tetramethyl-indocarbocyanine perchlorate)标记的高密度脂蛋白,可以用来观察培养细胞的HDL结合位点,或筛选HDL受体表达缺陷型细胞突变株。也可以通过流式细胞术评估细胞受体水平,或检测组织内的受体水平。
翊圣提供的Human DiI-HDL为无菌包装,可以直接稀释使用。除提供DiI-HDL,我们还提供不带标记的HDL,I125标记的HDL。
制备方法
纯化的人健康血浆来源的HDL直接标记上DiI荧光探针,然后通过超速离心以及透析的方法纯化回收标记产物,并滤膜过滤除菌。纯化的DiI-HDL溶于含0.02 mM EDTA的PBS,pH 7.4中。
产品性质
| 浓度(Concentration) | 0.8-3.0 mg/ml |
| 外观(Appearance) | 乳状液体 |
| 吸光度比例(Absorbance Ratio) | DiI/Protein=555nm/275nm=1.4 |
| 缓冲液组分(Buffer Components) | 0.02 mM EDTA in PBS, pH 7.4 |
运输与保存方法
冰袋运输;
4ºC无菌避光,收到货后可稳定保存6周。千万不可冻存!使用时一定要无菌操作!
注意事项
- 本品的稀释工作液极不稳定,建议即配即用;
- 长期贮存可能会有沉淀析出,属于正常现象,低速离心2 min去除沉淀即可使用;
- 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
操作步骤
- 无菌条件下,将DiI-HDL用细胞培养基稀释至10-30 µg/ml。
- 加入活细胞内,37℃培养4-5小时
- 孵育结束,吸去含有Human DiI-HDL的培养基,并用无探针的培养基洗几次。
- 根据实验需求用荧光显微镜或流式细胞仪检测。
采用标准的罗丹明激发:发射滤光片(或建议使用波长为:Ex/Em=549nm/565nm);若需要请使用含3%甲醛的PBS进行固定,切勿使用甲醇或丙-酮固定,因DiI易溶于有机溶剂。【注】:需设阳性细胞以做对照。
b)细胞分选(流式细胞术)
胰蛋白酶处理细胞或者加入EDTA制成单细胞悬液,选用合适的已标记纯化细胞用作阴性和阳性对照,从而进行流式分选设门(gate)。(建议使用波长为Ex: 514/549nm; Em: 565nm)。
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HB190708
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文献和实验佚名 HDL在肝脏和小肠中生成。HDL中的载脂蛋白含量很多,包括apoA、apoC、apoD和apoE等,脂类以磷脂为主。 HDL分泌入血后,新生的HDL为HDL3,一方面可作为载脂蛋白供体将apoC和apoE等转移到新生的CM和VLDL上,同时在CM和VLDL代谢过程中再将载脂蛋白运回到HDL上,不断与CM和VLDL进行载脂蛋白的变换。另一方面HDL
主要分为两大类,第一类是 PKH67(绿色荧光)/PKH26(红色荧光),由于它们可以与外泌体的脂质双层膜稳定结合,所以染色效果较好,应用较广泛。 图1 PKH67 标记的外泌体与神经元之间相互作用 Acta Neuropathol Commun. 2018 Feb 15;6(1):10. 图2 PKH26 标记的外泌体与 MDA‐MB‐231 细胞共培养 Cancer Sci. 2019 Oct;110(10):3173-3182. 第二类是 Di 系列的亲脂性染料,包括DiI(橙色荧
HDL主要由肝和小肠合成。肝合成的新生HDL以磷脂和ApoAⅠ为主。在LCAT作用下,游离胆固醇变成胆固醇酯,脂蛋白则变成成熟球形HDL3 ,再经LPL作用转变成HDL2 。 HDL可将蓄积于末梢组织的游离胆固醇与血液循环中脂蛋白或与某些大分子结合而运送到各组织细胞,主要是肝脏。实际上是胆固醇逆转(RCR),RCT促进组织细胞内胆固醇的清除,维持细胞内胆固醇量的相对衡定,从而限制动脉粥样硬化的发生发展,起到抗动脉粥样硬化作用。Golmset指出,LCAT通过转










