豚鼠基质金属蛋白酶9(MMP-9)ELISA试剂盒

上海笃玛生物科技有限公司ELISA试剂盒采用原装进口抗体，一步孵育，一步洗板，操作时间仅需90分钟，就能得到准确的实验结果，另刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质，此为正常现象，不会对实验结果造成任何影响，您尽可放心使用……我司专业销售各种属ELISA试剂盒，全力打造ELISA试剂盒网络销售平台。年中感恩回馈，您只需很少的经费就能买到上百万种质优价廉的科研试剂，不用货比三家，我们绝对令您满意！
产品名称：豚鼠基质金属蛋白酶9(MMP-9)ELISA试剂盒
产品英文：Guinea pig matrix metalloproteinase 9 (MMP-9) ELISA Kit
规格:96T/48T
保存条件:2-8℃低温保存
保质期:6个月,所有试剂均提供批次。
用途:科研实验专用，不可用于临床诊断。
豚鼠基质金属蛋白酶9(MMP-9)ELISA试剂盒说明书
1．试剂盒保存：-20℃(较长时间不用时)；2-8℃(频繁使用时)。
2．浓洗涤液低温保存会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。
3．中、英文说明书可能会有不一致之处，请以英文说明书为准。
4．刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质，此为正常现象，不会对实验结果造成任何影响。

豚鼠基质金属蛋白酶9(MMP-9)ELISA试剂盒实验原理
用纯化的抗体包被微孔板，制成固相载体，往包被抗该指标抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗该指标抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的该指标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)，计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制
1.酶联板(Assay plate )：一块(96孔)。
2.标准品(Standard)：2瓶(冻干品)。
3.样品稀释液(Sample Diluent)：1×20ml/瓶。
4.生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent)：1×10ml/瓶。
5.辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-avidin Diluent)：1×10ml/瓶。
6.生物素标记抗体(Biotin-antibody)：1×120μl/瓶(1：100)
7.辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin)：1×120μl/瓶(1：100)
8.底物溶液(TMB Substrate)：1×10ml/瓶。
9.浓洗涤液(Wash Buffer)：1×20ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10.终止液(Stop Solution)：1×10ml/瓶(2N )。

豚鼠基质金属蛋白酶9(MMP-9)ELISA试剂盒需要而未提供的试剂和器材
1. 标准规格酶标仪
2. 高速离心机
3. 电热恒温培养箱
4. 干净的试管和Eppendof管
5. 系列可调节移液器及吸头，一次检测样品较多时，最好用多通道移液器
6. 蒸馏水，容量瓶等
标本的采集及保存
1. 血清：全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
2. 血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
3. 细胞培养物上清或其它生物标本：1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
注：标本溶血会影响最后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。

标本处理因素
实验室人员收到标本后应认真查对，对不符合要求的标本和申请单要拘收，合格标本要及时分离血清，避免溶血，提取血清时不应混有大量纤维蛋白或细胞成分。对不能及时检测的标本要妥善保存于4℃冰箱，做好原始记录，标本管上最好标上待检者姓名、日期。从冰箱取出的标本要预温至室温，对冰冻的样品要融化好，并充分混匀再用。

豚鼠基质金属蛋白酶9(MMP-9)ELISA试剂盒标本的稀释原则：
ELISA的样本实验准备
在收集样本前都必须有一个完整的计划，必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天就进行检测的样本，及时储存在4℃备用。对于隔天再检测的样本，及时分装后冻存在-20℃备用，有条件的，最好-71℃冻存备用。标本
2. 血浆：
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
3. 尿液：
用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
4. 细胞培养上清：
检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。
5. 培养细胞
检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
6. 组织标本
切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。

90分钟一步法ELISA试剂盒：
1.高效，灵敏，特异的抗体
2.稳定的重复性和可靠性
3.吸附性能好，空白值低，孔底透明度高和固相载体
4.适用血清，血浆，组织匀浆液，细胞培养上清液，尿液等多种标本型

操作步骤
实验开始前，请提前配置好所有试剂，试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时，用样品稀释液进行稀释，以使样品符合试剂盒的检测范围。
1.加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。
为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。
2.弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液 100μl（取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制），37℃,60分钟。
3.温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干。
4.每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液（同生物素标记抗体工作液） 100μl，37℃，60分钟。
5.温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干。
6.依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。
7.依序每孔加终止溶液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8.用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。 在加终止液后15分钟以内进行检测。
注：
1. 用户在初次使用试剂盒时，应将各种试剂管离心数分钟，以便试剂集中到管底。
2. 每次实验留一孔作为空白调零孔，该孔不加任何试剂，只是最后加底物溶液及2N 。测量时先用此孔调OD值至零。
3. 为防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内，酶标板加上盖或覆膜。
4. 未使用完的酶标板或者试剂，请于2-8℃保存。标准品、生物素标记抗体工作液、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的标准品、生物素标记抗体工作液或、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液。
5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。
洗板方法
手工洗板方法：吸去（不可触及板壁）或甩掉酶标板内的液体；在实验台上铺垫几层吸水纸，酶标板朝下用力拍几次；将推荐的洗涤缓冲液至少0.3ml注入孔内，浸泡1-2分钟。根据需要，重复此过程数次。
自动洗板：如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正式实验过程中。
计算
以标准物的浓度为横坐标（对数坐标），OD值为纵坐标（普通坐标），在半对数坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。

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0472-50G	COOMASSIE® BRILLIANT BLUE R-250	考马斯亮蓝 R-250	超纯级	普货	蓝色至红色结晶粉末	RT	6104-59-2
0475-1G	2'-DEOXYGUANOSINE MONOHYDRATE	2’-脱氧鸟苷	超纯级	普货	白色结晶粉末	RT	961-07-9
0475-250MG	2'-DEOXYGUANOSINE MONOHYDRATE	2’-脱氧鸟苷	超纯级	普货	白色结晶粉末	RT	961-07-9
0477-100G	Succinic Acid Disodium Salt Hexahydrate	琥珀酸二钠盐六水	试剂级	普货	白色精细结晶物	RT	6106-21-4
0477-500G	Succinic Acid Disodium Salt Hexahydrate	琥珀酸二钠盐六水	试剂级	普货	白色精细结晶物	RT	6106-21-4
0478-2PK	TBE READY-PACK™, 10X	TBE 缓冲液 10X粉末包	超纯级	普货	白色粉末	RT	#N/A
0478-40L	TBE READY-PACK™, 10X	TBE 缓冲液粉末	超纯级	普货	白色粉末	RT	#N/A
0479-1G	OCTYL-β-D-GLUCOPYRANOSIDE	辛基-β-D-吡喃葡萄糖苷	试剂级	普货	白色晶体	FROZEN	29836-26-8
0479-500MG	OCTYL-β-D-GLUCOPYRANOSIDE	辛基-β-D-吡喃葡萄糖苷	试剂级	普货	白色晶体	FROZEN	29836-26-8
0479-5G	OCTYL-β-D-GLUCOPYRANOSIDE	辛基-β-D-吡喃葡萄糖苷	试剂级	普货	白色晶体	FROZEN	29836-26-8
0481-25G	2'-DEOXYTHYMIDINE	2’-脱氧胸苷	超纯级	普货	白色结晶粉末	RT	50-89-5
0481-5G	2'-DEOXYTHYMIDINE	2’-脱氧胸苷	超纯级	普货	白色结晶粉末	RT	50-89-5
0484-2.5KG	SODIUM THIOSULFATE, PENTAHYDRATE	硫代硫酸钠,五水	高纯级	普货	半透明至白色结晶粉末	RT	10102-17-7
0484-500G	SODIUM THIOSULFATE, PENTAHYDRATE	硫代硫酸钠,五水	高纯级	普货	半透明至白色结晶粉末	RT	10102-17-7
0485-100G	HEPES SODIUM SALT	HEPES, Na	高纯级	普货	白色粉末	RT	75277-39-3
0485-25G	HEPES SODIUM SALT	HEPES, Na	高纯级	普货	白色粉末	RT	75277-39-3
0485-500G	HEPES SODIUM SALT	HEPES, Na	高纯级	普货	白色粉末	RT	75277-39-3
0486-100G	AMMONIUM PERSULFATE (APS)		ACS级	危险品	白色结晶粉末	RT
0486-25G	AMMONIUM PERSULFATE (APS)		ACS级	危险品	白色结晶粉末	RT
0487-100G	IPTG	IPTG	超纯级	普货	白色结晶粉末	FROZEN	#N/A
0487-10G	IPTG	IPTG	超纯级	普货	白色结晶粉末	FROZEN	#N/A
0487-1G	IPTG	IPTG	超纯级	普货	白色结晶粉末	FROZEN	#N/A
0488-100G	PIPES FREE ACID	PIPES FREE ACID	高纯级	普货	白色结晶粉末	RT	5625-37-6
0488-500G	PIPES FREE ACID	PIPES FREE ACID	高纯级	普货	白色结晶粉末	RT	5625-37-6
0494-25G	DL-THIOCTIC ACID (OXIDIZED)	DL-硫辛酸（氧化型）	高纯级	普货	黄色结晶粉末	RT	1077-28-7
0494-5G	DL-THIOCTIC ACID (OXIDIZED)	DL-硫辛酸（氧化型）	高纯级	普货	黄色结晶粉末	RT	1077-28-7
0496-1L	ACRYL/BIS™ 19:1		超纯级	危险品	透明无色溶液	COLD	#N/A
0496-500ML	ACRYL/BIS™ 19:1		超纯级	危险品	透明无色溶液	COLD	#N/A
0497-500G	TRIS	TRIS	超纯级	普货	白色结晶粉末至针状晶体	RT	77-86-1
0497-50KG	TRIS	TRIS	超纯级	普货	白色结晶粉末至针状晶体	RT	77-86-1