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- 上海
- 2025年07月06日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量现货
- 供应商：
上海笃玛生物科技有限公司
- 检测范围：
电询
- 检测方法：
ELISA
- 应用：
电询
- 标记物：
电询
- 样本：
血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
- 规格：
96T/48T
豚鼠白介素4(IL-4)ELISA试剂盒免费代测
豚鼠白介素4(IL-4)ELISA试剂盒免费代测
适用的样本类型
血清、血浆、细胞上清液、胸腹水、脑脊液、处理后的固体样本等检测方法
双抗体夹心法
用途
科学研究
试剂盒性能
有效期：6个月 保存条件：2-8℃，避光防潮保存
准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数 R 值，大于等于 0.9600
特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应
重复性：板内、板间变异系数均小于 15%
豚鼠白介素4(IL-4)ELISA试剂盒免费代测
检测原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被相关指标的抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并 洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的相关指标呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000 转离心 10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心 30 分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000 转离心 10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心 10 分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解 冻并确保样品均匀地充分解冻。
豚鼠白介素4(IL-4)ELISA试剂盒免费代测
豚鼠白介素4(IL-4)ELISA试剂盒免费代测
1. 酶标仪（450nm）
2. 高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒温箱
操作注意事项
1. 试剂盒保存在 2-8℃，使用前室温平衡 20 分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
3. 浓度为 0 的标准品可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释 5 倍，最终结果乘以5才是样本最终浓度。
4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5. 所有液体组分使用前充分摇匀。
6. 若中英文说明书有误，请以中文说明书为准。
7. 20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按 1：20 稀释，即 1 份的 20×洗涤缓冲液加 19 份的蒸馏水。
8. 不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
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洗板方法
1.手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液，静置 1min 后甩尽孔内液体，在吸水纸上拍干，如此洗板 5次。2.自动洗板机：每孔注入洗液 350μL，浸泡 1min，洗板 5 次。
试剂盒组成
名称 96 孔配置 48 孔配置 备注
微孔酶标板 12 孔×8 条 12 孔×4 条 无
标准品 0.5mL 0.5mL 按说明书进行稀释
标准品稀释液 6mL 3mL 按说明书进行稀释
样本稀释液 6mL 3mL 按说明书进行稀释
检测抗体-HRP 6mL 3mL 无
20×洗涤缓冲液 20mL 20mL 按说明书进行稀释
底物 A 6mL 3mL 无
底物 B 6mL 3mL 无
终止液 6mL 3mL 无
封板膜 2 张 2 张 无
说明书 1 份 1 份 无
自封袋 1 个 1 个 无
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操作步骤
1.从室温平衡 20min 后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回 4℃。2. 设置标准品孔、样本孔和空白孔，空白孔什么都不加；标准品孔各加不同浓度的标准品 50μL；
3. 待测样本孔先加待测样本 10μL，再加样本稀释液 40μL；
4. 随后标准品孔和样本孔中（空白孔不加）加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体 50μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育 60min。
5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置 1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗 板 5 次（也可用洗板机洗板）。
6. 所有孔加入底物 A、B 各 50μL，37℃避光孵育 15min。
7. 所有孔加入终止液 50μL，15min 内，在 450nm 波长处测定各孔的 OD 值。
结果判断
绘制标准曲线：在Excel工作表中，以标准品浓度作横坐标，对应OD值作纵坐标，绘制出标准品线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值。
免责声明
试剂盒仅供研究使用，不得用于临床实验或生物体实验，否则所产生的一切后果，由实验者承担， 本公司概不负责。
严格按照说明书操作，不同批号不可交换使用，实验者违反说明书操作，后果由实验者承担。
豚鼠白介素4(IL-4)ELISA试剂盒免费代测
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并 洗涤。
用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
此套件的交货时间为2-3天。
*保存温度：2 - 8 C。
*保质期：6个月。
*国内快递.
凡在本公司购买ELISA试剂盒，可提供免费待测服务，视样本数量而定出结果时间，一般一周内出检测结果！
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代理品牌：
| Pentapharm | 2018 瑞士是一个长期以来的传统，作为一个创新和可靠的药物，诊断和化妆品行业的活性成分供应商 |
| biotium | 美国加利福尼亚州 荧光化合物产品 |
| hmgbiotech | 意大利米兰 重组蛋白 稳定标记蛋白质 蛋白质试剂盒 质粒 HMGB1相关产品 |
| biochemazone | biochemazone提供高质量和纯化的人工生物化学品、试剂，以及人工唾液、人工渗透、模拟尿液、模拟肺液、模拟体液 （SBF） 和各种模拟生物体液 |
| virogates | 2020 丹麦 ViroGates 是一家国际 Medtech 公司，总部位于丹麦，哥本哈根北部。 和联合创始人 Jesper Eugen-Olsen 最初发现了生物标志物 suPAR 在 HIV 中的效用。随后发表了 800 多篇出版物，证实 suPAR 是 希望的跨疾病预后生物标志物之一。ViroGates 开发了一种名为 suPARnostic® 的产品线，以使 suPAR 测试商业化。 |
| Cellabs | Cellabs 是一家总部位于澳大利亚悉尼的生物技术公司，专门从事热带和传染病免疫诊断试剂盒的设计、开发和制造。 |
| cellsciences | Cell Sciences公司是一家为生命科学研究领域提供免疫化学和血液学试剂的专业供货商。该公司主要产品有重组细胞因子、细胞因子受体、趋化因子、激酶、磷酸酶、Elisa与Elispot试剂盒、单克隆抗体、多克隆抗体与抗体配对等相关实验服务，并提供用于Elisa实验的细胞因子配对抗体，单个细胞因子检测试剂盒等产品。 |
| intrinsiclifesciences | Intrinsic LifeSciences 创造了仅用于研究的高质量产品，用于测量人类和临床前动物模型中的铁调素和赤铁酮 (ERFE)。Intrinsic Hepcidin IDx™、Hepcidin Murine Compete™ 和灵长类 Hepcidin Compete™ ELISA 试剂盒分别测量人类、小鼠和非人类灵长类动物受试者中的铁调素。我们已经扩展了我们的互补产品线，包括 Intrinsic Erythroferrone IE™ 和 Intrinsic Mouse Erythroferrone™ ELISA 试剂盒，以测量人和小鼠血清中的 ERFE。 |
| arthusbio | 2018美国位于加利福尼亚州里士满，提供全新的检测S-腺苷蛋氨酸(S-adenosylmethionine, SAM)和甲基化指数的系列研究工具。 |
| junyanbios | 君研生物已经推出重组胰蛋白酶类似物定量检测试剂盒、重组核酸酶定量检测试剂盒、BSA定量检测试剂盒、宿主细胞DNA样品前处理试剂盒（通用型）、宿主细胞残留 DNA（qPCR）检测试剂盒（E.coli、Vero、CHO、HEK293）、SuperBenzoTM Nuclease超级核酸酶等产品。 宿主蛋白残留检测试剂盒 cygnus重组胰蛋白酶类似物定量检测试剂盒重组核酸酶定量检测试剂盒宿主细胞残留DNA（磁珠法）样本前处理试剂盒全自动核酸提取仪E.coli残留DNA（qPCR）检测试剂盒Vero残留DNA（qPCR）检测试剂盒Vero宿主细胞残留DNA（磁珠法）样本前处理试剂盒CHO残留DNA（qPCR）检测试剂盒重组核酸酶重组胰蛋白酶类似物定量检测试剂盒重组核酸酶定量检测试剂盒宿主细胞残留DNA（磁珠法）样本前处理试剂盒全自动核酸提取仪E.coli残留DNA（qPCR）检测试剂盒Vero残留DNA（qPCR）检测试剂盒Vero宿主细胞残留DNA（磁珠法）样本前处理试剂盒CHO残留DNA（qPCR）检测试剂盒重组核酸酶 |
| fluoroprobes | 2021年美国染料、试剂等 |
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文献和实验标本的采集及保存
1.血清：全血标本请于室温放置2小时或4℃过一晚后于1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
2.血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
3.细胞培养物上清或其它生物标本：1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。 (注：标本溶血会影响**检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。)
标本的稀释原则：首先通过文献检索的方式了解待测样本的大致含量，确定适当的稀释倍数。只有稀释至标准曲线的范围内，检测的结果才是准确的。稀释的过程中，应做好详细的记录。计算浓度时，稀释了“N”倍，标本的浓度应再乘以“N”。
标准品的稀释原则：2瓶，每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml，盖好后静置10分钟以上，然后反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为300 pg/ml，做系列倍比稀释后，分别稀释300 pg/ml，150 pg/ml，75 pg/ml，37.5 pg/ml，18.5 pg/ml，9 pg/ml，4.5 pg/ml，样品稀释液直接作为标准浓度0 pg/ml，临用前15分钟内配制。 如配制150 pg/ml标准品：取0.5ml（不要少于0.5ml）300 pg/ml的上述标准品加入含0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
生物素标记抗体的稀释原则：临用前以生物素标记抗体稀释液稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制（每孔100μl），实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素标记抗体加990μl生物素标记抗体稀释液的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。
辣根过氧化物酶标记亲和素的稀释原则：临用前以辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制（每孔100μl），实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根过氧化物酶标记亲和素加990μl辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。
操作步骤
实验开始前，请提前配置好所有试剂，试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时，用样品稀释液进行稀释，以使样品符合试剂盒的检测范围。
1.加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。 为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。
2.弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液 100μl（取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制），37℃,60分钟。
3.温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干。
4.每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液（同生物素标记抗体工作液） 100μl，37℃，60分钟。
5.温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干。
6.依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。
7.依序每孔加终止溶液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8.用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。 在加终止液后15分钟以内进行检测。
注意事项
1.用户在初次使用试剂盒时，应将各种试剂管离心数分钟，以便试剂集中到管底。
2.每次实验留一孔作为空白调零孔，该孔不加任何试剂，只是加底物溶液及2N 。测量时先用此孔调OD值至零。
3.为防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内，酶标板加上盖或覆膜。
4.未使用完的酶标板或者试剂，请于2-8℃保存。标准品、生物素标记抗体工作液、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的标准品、生物素标记抗体工作液或、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液。
5.建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。
洗板方法
手工洗板方法：吸去（不可触及板壁）或甩掉酶标板内的液体；在实验台上铺垫几层吸水纸，酶标板朝下用力拍几次；将推荐的洗涤缓冲液至少0.3ml注入孔内，浸泡1-2分钟。根据需要，重复此过程数次。
自动洗板：如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正式实验过程中。
计算
以标准物的浓度为横坐标（对数坐标），OD值为纵坐标（普通坐标），在半对数坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。
注意事项
1.当混合蛋白溶液时应尽量轻缓，避免起泡。
2.洗涤过程非常重要，不充分的洗涤易造成假阳性。
3.一次加样时间**控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4.请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。
5.如标本中待测物质含量过高，请先稀释后再测定，计算时请乘以稀释倍数。
6.在配制标准品、检测溶液工作液时，请以相应的稀释液配制，不能混淆。
7.底物请避光保存。
8.不要用其它生产厂家的试剂替换试剂盒中的试剂。
注意事项：收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本，储存在4 ℃备用，如有特殊原因需要周期收集标本， 将标本及时分装后放在-20 ℃或-70 ℃条件下保存。避免反复冻融。标本2 -8 ℃可保存48 小时，-20 ℃可保存1 个月。-70度可保存6 个月。部分激素类标本需添加抑肽酶。
计算：以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。
试剂盒性能
1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.92以上。
2.批内与批见应分别小于9%和15%
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