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- 2025年08月01日
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- 技术资料
- 库存：
大量
- 供应商：
上海哈灵生物科技有限公司
- 检测范围：
仅供科研
- 检测方法：
酶联免疫
- 应用：
科研
- 标记物：
详见说明书
- 样本：
血清，血浆，尿液，胸腹水，脑脊液，细胞培养上清，组织匀浆等
猪骨钙素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA试剂盒原理：ELISA是以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。由于抗原、抗体的反应在一种固相载体──聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行，每加入一种试剂孵育后，可通过洗涤除去多余的游离反应物，从而保证试验结果的特异性与稳定性。在实际应用中，通过不同的设计，具体的方法步骤可有多种。即:用于检测抗体的间接法(图a)、用于检测抗原的双抗体夹心法(图b)以及用于检测小分子抗原或半抗原的抗原竞争法等等。比较常用的是ELISA双抗体夹心法及ELISA间接法。
猪骨钙素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA试剂盒价格 上海哈灵生物公司提供ELISA试剂盒产品种属分布：
家禽类：鸡、鸭、鹅等。
飞禽类：鸽子、鸟类等。
水产类：鱼、牛蛙等。
动物类：小鼠、大象、虎、羊、马、蝌蚪、蟾蜍、牛、熊猫、金黄地鼠、猪、兔、蜥蜴、河马、猕猴、类人猿、狒狒、鹿等。
猪骨钙素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA试剂盒操作步骤
方法一 用于检测未知抗原的双抗体夹心法:
1. 包被：用0.05M PH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1～10μg／ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml，4℃ 过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次，每次3分钟。(简称洗涤，下同)。
2. 加样：加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中，置37℃ 孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔)。
3. 加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小时，洗涤。
4. 加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分钟。
5. 终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。
6. 结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm(若以ABTS显色，则410nm)处，以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。
注意事项
1. 正式试验时，应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件，待检样品应作一式二份，以保证实验结果的准确性。有时本底较高，说明有非特异性反应，可采用羊血清、兔血清或BSA等封闭。
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文献和实验下调不能说明活性降低，因为决定GSK3-beta的活性的还与其磷酸化的比例和磷酸化的位点有关。所以你除了要做GSK3-beta总的蛋白表达之外，还要做磷酸化的GSK3-beta的蛋白表达。 （2）应该活性形式和非活性形式都做。一般来讲，GSK3-beta在Ser9位点磷酸化之后活性收到抑制，而在216位点磷酸化之后，其活性收到加强。因此建议将GSK3-beta的两个磷酸化位点都做了，另外还要同时检测GSK3-beta的总蛋白表达，这样才能全面的说明问题。
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