WWOX Antibody

WWOX Antibody提供各种一抗，二抗，单克隆，多克隆抗体以及不同蛋白的各种标记服务、各种纯化服务及载体蛋白连接服务，提供抗体、抗原亲和层析柱装配服务，欢迎来电咨询。
步骤：1. 分离胶和积层胶，制胶板；
注意：灌分离胶时不要加太多。
2. 蛋白变性：准备蛋白样本，WWOX Antibody加入等体积的2×上样Buffer稀释，置于沸水中煮10min（预染marker煮5min）
3. 加样：每孔加入20～40μl样品
4. 电泳：置于电泳槽中电泳45min，恒定电流90mA(2快板），如为一块板则电流为50 mA。
5. 取出胶板，用切割刀修好胶；
6. 将胶置于转膜液中浸泡；
7. 按顺序放好下列物质：黑面→海绵→滤纸→胶→NC膜→滤纸（用吸管赶去气泡）→海绵；
8. 置于转膜槽中于，黑面对黑面，加上冰块，加入转膜液；
9. 装好电极，于恒定电压100V下，90min；
10. 丽春红染膜；
11. WWOX Antibody用TBST洗去丽春红；
12. 封闭：加入5％脱脂奶粉＋TBST，常温摇床摇1h；
13. 回收封闭液，加入一抗【一抗用5％BSA＋TBS稀释】；
14. 置于4℃摇床摇过夜；
15. 回收一抗，TBST洗膜，10min，共3次；
16. 加入二抗【二抗用5％脱脂奶粉＋TBS稀释】，常温摇床摇1h；
17. 回收二抗，TBST洗膜，10min，共3次；
18. 将膜置于发光液中浸泡约1min；
19. 将膜铺于曝光盒中，于暗室中曝光，洗胶片。
大规模单克隆抗体的生产目前主要有两种方式，WWOX Antibody一是腹水制备法，另一种是转瓶培养法。腹水制备法：将杂交瘤细胞株进行体外培养至一定浓度，再将杂交瘤细胞注入小鼠腹腔中，产生腹水，从腹水中纯化单克隆抗体。每只小鼠可以产生3~8 mL腹水，抗体含量可以达到1~10 mg/mL。腹水制备的周期为3~4周。腹水制备法具备成本低、产量高，时间快等优点，是目前主要的大规模抗体生产方式。转瓶培养法：将杂交瘤细胞进行大规模体外培养，从培养基中纯化抗体。抗体含量可以达到20~80 mg/L。转瓶制备法具有抗体品质高、不含小鼠杂蛋白，不含动物病毒等优点。
WWOX Antibody其它相关产品展示：xy-5236R phospho-CDKN1B (Ser178)磷酸化P27抗体/周期素依赖激酶抑制剂抗体
xy-5237R phospho-CDKN1A (Thr145)磷酸化p21蛋白抗体
xy-5238R phospho-CDKN1A (Thr57)磷酸化p21蛋白抗体
xy-15304R c8orf848号染色体开放阅读框84抗体
xy-5239R phospho-CDKN1A (Ser146)磷酸化p21蛋白抗体
xy-3060R Phospho-CEBP alpha (Ser21)磷酸化转录调节因子CEBP α 抗体
xy-2683R CLEC2DCLEC2D蛋白抗体
xy-8185R CRELD2富含半胱氨酸与表皮生长因子样蛋白2抗体
xy-8186R CRYZL1醌氧化还原酶样蛋白1抗体
xy-8180R COMMD9铜代谢结构域蛋白9抗体
xy-7734R CAPD3浓缩素2复合亚基D3抗体
xy-5246R phospho-Cdc6 (Ser54)磷酸化细胞分裂周期蛋白6抗体
xy-5247R Phospho-cdc2 (Ser39)磷酸化周期素依赖激酶2抗体
xy-6025R CA12碳酸酐酶12抗体
xy-3813R CDC34B泛素载体蛋白R2抗体
xy-6027R CADM3细胞粘附分子3抗体
xy-2386R CD47整合素相关蛋白CD47
xy-3743R phospho-CK8 (Ser23)磷酸化细胞角蛋白8抗体
xy-3758R Calbindin钙结合蛋白D28K抗体
xy-3738R phospho-Crkl(Tyr251)磷酸化接头蛋白CrkL抗体
xy-3739R phospho-Crkl (Tyr207)磷酸化接头蛋白CrkL抗体
xy-2791R CRHR1促肾上腺皮质释放激素受体1抗体
xy-3099R Phospho-Cofilin (Ser3)磷酸化丝切蛋白抗体
xy-2760R Cortactin皮层肌动蛋白抗体
xy-2792R CRHR2促肾上腺皮质释放激素受体2抗体
xy-3241R Phospho-c-Kit(Tyr703)磷酸化原癌基因c-kit抗体
xy-3242R Phospho-c-Kit(Tyr721)磷酸化原癌基因c-kit抗体
xy-2727R CRLF2胸腺基质淋巴细胞生成素受体抗体
xy-4083R phospho-c-Abl (Tyr134)磷酸化非受体酪氨酸激酶c-Abl抗体
xy-4084R phospho-c-Abl (Tyr253)磷酸化非受体酪氨酸激酶c-Abl抗体
xy-5149R CPI17 alpha蛋白磷酸激酶PKC/CPI-17抗体
xy-4085R phospho-c-Abl(Tyr272)磷酸化非受体酪氨酸激酶c-Abl抗体
xy-4086R phospho-c-Abl(Tyr276)磷酸化非受体酪氨酸激酶c-Abl抗体